4.**培養條件**:-培養基的制備方法包括稱取基礎培養基14.2g加入180ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取1.2g李斯特氏菌添加劑,加入20ml無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動,使其乳化均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌15分鐘。冷至50℃左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑,混勻,傾入無菌平皿。5.**質量控制**:-質控菌株在37℃培養24-48小時,單增李斯特氏菌和綿羊李斯特氏菌在該培養基上生長良好,形成藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。其他菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌則不生長或生長不良。6.**儲存條件**:-制備好的固體平板保存于2-8℃,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃。7.**注意事項**:-嚴格按照標簽說明進行配制培養基,避免混合時培養基和添加劑溫度過高導致平板出現絮狀物。干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。這些特點使得李斯特氏菌顯色培養基在食品衛生微生物檢驗中具有重要的應用價值。SDA中添加的物質(如氯霉素或慶大霉素)可以抑制細菌的生長,從而使得菌種在培養過程中成為優勢菌群。改良GC肉湯基礎
改良Frey氏培養基是一種專門用于支原體培養的培養基,具有以下特點:1.**成分組成**:-改良Frey氏培養基的基礎配方包括氯化鈉、氯化鉀、磷酸二氫鉀、水解乳蛋白、酚紅、硫酸鎂、磷酸氫二鈉、葡萄糖、酵母浸粉和醋酸鉈。每升培養基中具體分量為氯化鈉5.0克,氯化鉀0.4克,磷酸二氫鉀0.2克,水解乳蛋白5.0克,酚紅0.1克,硫酸鎂0.2克,磷酸氫二鈉1.4克,葡萄糖10.0克,酵母浸粉25.0克,醋酸鉈0.1克,pH值控制在7.7±0.1。2.**用途**:-主要用于培養滑液支原體及其他禽支原體。特別適合于滑液支原體的培養和檢測。3.**pH值**:-改良Frey氏培養基的pH值在7.6~7.8之間,適合支原體的生長。4.**靈敏度和穩定性**:-改良Frey氏液體培養基為澄清、無雜質,呈玫瑰紅色的液體;經靈敏度檢驗,液體培養基靈敏度菌達到10^-8及以上,且陰性對照無變色,證明該培養基靈敏度高。5.**使用方法**:-稱取47.4克培養基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,116℃高壓滅菌30分鐘,冷至45℃左右時加入100ml無菌馬血清、輔酶I0.1g、L-半胱氨酸0.1g、精氨酸0.4g和青霉素80萬單位。6.**添加劑**:-可加入改良Frey添加劑,每支添加于1000ml改良Frey氏培養基中,以增強培養效果。0.1%TTC溶液LESEndo瓊脂(也稱為m-Endo Agar或LES)是一種用于微生物學檢測的培養基,用于水中大腸菌群的濾膜法計數。
在配制改良高氏二號培養基時,如果遇到成分沉淀問題,可以采取以下措施進行處理:1.**充分溶解**:確保所有成分在加入之前已經充分溶解。對于不易溶解的成分,如瓊脂,需要在加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解。2.**調整溶解順序**:根據各成分的溶解特性,調整添加順序。通常先溶解無機鹽和維生素,再加入有機物質。3.**使用輔助溶劑**:對于某些難溶成分,可以考慮使用適當的溶劑或助溶劑來幫助溶解。4.**避免混合沉淀**:在混合不同成分時,要注意避免因成分相互作用而產生沉淀。例如,避免將鈣鹽和磷酸鹽直接混合。5.**控制pH值**:pH值的變化可能會影響某些成分的溶解度,因此在調節pH值時要小心,確保在成分完全溶解后再進行。6.**分步滅菌**:如果培養基中某些成分不耐熱,可以考慮分步滅菌。即先滅菌大部分成分,冷卻后再添加不耐熱的成分。7.**過濾**:如果沉淀物已經形成,可以通過過濾來去除。使用適當孔徑的濾紙或濾網過濾培養基。8.**攪拌**:在溶解和加熱過程中,持續攪拌可以減少沉淀的形成。9.**使用螯合劑**:對于易氧化的成分,如硫酸亞鐵,可以使用螯合劑(如EDTA)來防止沉淀和氧化。
乙基紫疊氮鈉肉湯(EthylVioletAzideBroth,簡稱EVA肉湯)是一種用于微生物學中培養鏈球菌的選擇性培養基。以下是其特點:1.**成分**:EVA肉湯的主要成分包括酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、疊氮鈉和乙基紫。這些成分為細菌提供必需的營養和生長環境,同時提供選擇性抑制和指示作用。2.**pH值**:培養基的pH值控制在7.0±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長條件。3.**選擇性**:疊氮鈉是一種抑制劑,能夠抑制革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性產芽孢菌的生長,而乙基紫作為指示劑,有助于識別特定菌落。4.**應用**:EVA肉湯主要用于鏈球菌的增菌培養,尤其是在食品微生物檢測中用于指示食品是否受到糞便或污水污染。5.**制備方法**:將EVA肉湯的干粉與蒸餾水混合,加熱煮沸至完全溶解,然后進行高壓滅菌,通常在121℃下滅菌15分鐘。6.**質量控制**:使用標準菌株進行質量控制,確保培養基能夠支持目標微生物的生長,并抑制非目標微生物。7.**儲存條件**:通常建議在陰涼干燥的條件下儲存,以保持培養基的穩定性和有效性。乙基紫疊氮鈉肉湯因其選擇性和指示性特點,在微生物實驗室中被用于特定菌種的分離和鑒定。MEE肉湯廣泛應用于食品衛生檢驗、水質分析、醫藥、臨床和化妝品等領域的微生物檢測。
濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于水或其他樣品中腸球菌分離或計數的培養基,特別適用于濾膜法檢測。以下是其主要特點:1.**成分**:該培養基包含胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)等成分,為腸球菌提供碳源、氮源并抑制其他細菌生長,同時TTC作為顯色劑。2.**pH值**:培養基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),以適應腸球菌的生長需求。3.**選擇性**:疊氮化鈉在培養基中起到抑制非目標細菌生長的作用,特別是對革蘭氏陰性菌有較好的抑制效果。4.**指示性**:TTC作為顯色劑,當腸球菌生長并代謝時,能夠將TTC還原成紅色的三苯甲月替,使菌落呈現紅色,便于識別。5.**應用**:主要用于水和液體樣品中腸球菌的分離和計數,適用于環境監測和食品衛生檢測。6.**制備方法**:通常稱取培養基42.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,冷卻至45-50℃時傾入無菌平皿備用,無需高壓滅菌。7.**儲存條件**:建議在陰涼干燥處儲存,保質期通常為三年。8.**質量控制**:使用標準菌株進行質量控制,確保培養基的選擇性和指示性特點。濾膜腸球菌瓊脂因其選擇性和指示性特點,在微生物檢測和分類中發揮著重要作用。改良番茄汁瓊脂培養皿的制備方法包括將干粉成分加入蒸餾水,加熱溶解,校正pH值,然后進行高壓滅菌。NGM培養基添加劑
動力吲哚尿素(MIU)培養基基礎是一種用于細菌復合生化試驗的培養基,它允許進行多個試驗的同步進行。改良GC肉湯基礎
YEPD培養基(YeastExtractPeptoneDextroseMedium)是一種常用于酵母菌和細菌培養的培養基,具有以下特點:1.**成分**:-**酵母提取物**:提供豐富的B族維生素、氨基酸和礦物質,促進酵母菌和細菌的生長。-**蛋白胨**:提供氮源和必需氨基酸,支持細菌的生長。-**葡萄糖**:作為主要碳源,提供能量和代謝底物。-**蒸餾水**:作為溶劑,溶解其他成分。2.**營養成分**:-YEPD培養基的典型配方為:1%酵母提取物、2%蛋白胨和2%葡萄糖。3.**pH值**:-通常在pH5.0-6.0之間,適合酵母菌和大多數細菌的生長。4.**應用范圍**:-用于酵母菌和細菌的培養、篩選和研究。-常用于分子生物學實驗中的酵母菌轉化和篩選。5.**制備方法**:-將YEPD培養基粉末按比例稱取,加入蒸餾水,加熱至完全溶解,然后進行高壓蒸汽滅菌。6.**儲存條件**:-滅菌后的YEPD培養基應儲存在2-8°C的冰箱中,避免反復凍融。7.**使用說明**:-培養基在使用前應充分搖勻,確保成分均勻分布。-接種時需在無菌條件下進行,避免污染。8.**培養條件**:-通常在30°C的恒溫條件下培養,培養時間根據實驗需要而定。 改良GC肉湯基礎