天然培養基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期,體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養基所替代。普遍使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規程執行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。含血清培養基是一種以動物血清為主的培養基普遍用于誘導細胞分化和胚胎發育研究等方面。SC瓊脂基礎
培養基的分類有幾種呢?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,按培養基的物理狀態區分:1.液體培養基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。2.固體培養基,一類配制成的固體狀態的基質。根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。3.半固體培養基,指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。4.脫水培養基,又稱預制干燥培養基,指含有除水分外的一切成分的商品培養基。BYP瓊脂培養基基礎半固態培養基是一種介于液態培養基和固體培養基之間的混合形式,常用于篩選微生物菌株。
胰島素(Insulin)作用普遍,包括調節脂肪和蛋白質的代謝以及促進細胞生長等。胰島素功能的發揮源于其對細胞的作用,進而引起組織乃至機體的整體反應。一般可將胰島素在細胞水平的作用分為三大類:代謝作用、促生長作用、以及代謝和促生長混合作用。胰島素對細胞的代謝調節作用主要是通過其與細胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導,而胰島素對細胞的促生長作用則是通過其與細胞膜上胰島素的樣生長的因子受體(IGF Receptor, IG)相互作用而介導的。在無血清細胞培養液中,常添加胰島素來維持細胞生長,調節細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存,同時抑制糖原、蛋白質和脂肪的分解。
選擇性培養基(selective media) 選擇性培養基含有營養物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑),標本接種于此類培養基后,由于抑菌劑的選擇性抑制作用,使非目的菌受到不同程度的抑制,更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養基經過一定時間的增菌培養,再接種于選擇性鑒別培養基,可以提高目的菌的陽性檢出率。抑菌劑的種類很多,常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準確,有的劇毒,有的不耐高熱,配制時須特別注意。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養基為營養瓊脂平板培養基。
在培養基中加入 HEPES 有何好處?培養基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營養,但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強的緩沖劑,能使細胞培養基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養基pH迅速變動。在開放式培養條件下,觀察細胞時培養基脫離了 5%CO2 的環境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持 pH7.0 左右。一般在進行克隆化培養時要添加HEPES。神經細胞原代培養的過程中能用到。牛肉精蛋白胨培養基是常用的富營養培養基,適用于快速生長的微生物。Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養基基礎
培養基可以分為有機培養基和無機培養基兩類。SC瓊脂基礎
細菌培養基之面粉瓊脂培養基:面粉60g,瓊脂20g,水1000ml把面粉用水調成糊狀,加水到500ml,放在文火上煮30分鐘。另取500ml水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解后,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到7.4,分裝,滅菌,備用。微藻培養基,BG-11培養基:NaNO3 1.5g,K2HPO4 ·3H2O0.04g,MgSO4·7H2O0.075g,CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid (檸檬酸)0.006g,Ferric ammonium citrate(檸檬酸鐵銨0.006g,EDTA (dinatrium-salt) 0.001g,Na2CO3 0.02g,A5 + Co solution * (A5溶液1000×)1ml Distilled Water (蒸餾水)919ml。
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