DTA培養基(葡萄糖胰蛋白胨瓊脂)是一種用于微生物培養的培養基,其特點和使用方法如下:1.**用途**:DTA培養基主要用于嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養。2.**成分**:該培養基的成分通常包括胰酪蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和溴甲酚紫。具體成分比例為胰酪蛋白胨10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、瓊脂15.0g/L以及溴甲酚紫0.04g/L。3.**pH值**:pH值控制在6.7±0.1(25℃)。4.**檢驗原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。5.**配制方法**:稱取30.0gDTA培養基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,然后在121℃下高壓滅菌15分鐘,備用。6.**使用方法**:在加熱滅菌前,培養基成分應邊攪拌邊溶解于水中。滅菌時間通常要在121℃下保持15~20分鐘,這個時間從中心溫度達到121℃開始計算。7.**結果觀察**:嗜熱脂肪芽孢桿菌在DTA培養基上的生長特征為黃色菌落。8.**微生物靈敏度試驗**:按標簽用法制備培養基,接種質控菌株,放置于55℃需氧培養48小時,以驗證培養基的性能。盡管哥倫比亞血瓊脂基礎有許多優點,但也存在一定的局限性,如對嗜血桿菌生長的抑制以及受血液類型的影響。CATC瓊脂平板
NGKG瓊脂基礎是一種用于食品中蠟樣芽孢桿菌分離培養的培養基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:NGKG瓊脂基礎的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化鈉、甘氨酸、苯酚紅和瓊脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持滲透壓;甘氨酸提供氮源;苯酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。2.**pH調節**:NGKG瓊脂基礎的pH值通常調節在6.8±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加物**:在冷卻至50℃左右時,需要加入20%卵黃液100mL(卵黃液制備:取無菌卵黃液20mL,生理鹽水80mL,混勻)。卵黃液提供卵磷脂,產卵磷脂酶的細菌可水解卵磷脂,使其菌落周圍形成一個白色的沉淀環。5.**抗生物質**:每200mL培養基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革蘭氏陰性細菌生長。6.**用途**:NGKG瓊脂基礎主要用于食品中蠟樣芽孢桿菌的分離培養。7.**培養特征**:在30℃±1℃需氧培養18-24小時后,典型的蠟樣芽孢桿菌在NGKG瓊脂基礎上表現為淺紅色菌落,邊緣不規則,有卵磷脂沉淀環。8.**質量控制**:通過接種質控菌株并觀察培養特征來驗證培養基的質量。 厭氧卵黃瓊脂預裝培養皿TSFA主要用于乳制品中嗜冷菌菌落總數和需氧芽孢總數的測定,對于確保乳制品的質量和安全至關重要 。
TGE肉湯(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉湯,是一種用于微生物培養的液體培養基。這種培養基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作為指示劑的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉湯(含TTC)的主要用途和特點如下:1.**用途**:TGE肉湯主要用于水、牛奶和乳制品中異養細菌的計數。它適用于細菌總數的測定,也可用于檢測乳品中的耐熱細菌。2.**成分**:典型的TGE肉湯配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子,葡萄糖作為可發酵的糖類提供能量。3.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常調節在7.0±0.2(25℃)。4.**制備方法**:將TGE肉湯的干粉溶解在蒸餾水中,加熱煮沸以幫助成分溶解,然后進行高壓滅菌。5.**使用**:通常取一定量的培養基加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌,然后用于微生物的培養。6.**指示劑**:TTC作為指示劑,當細菌代謝時,TTC會被還原成紅色的三苯基甲烷,從而便于觀察細菌的生長情況。7.**保存條件**:未開封的TGE肉湯通常在室溫下避光保存,開封后應旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊,并根據存放條件適當延長保存期。
改良亞硫酸鹽瓊脂(ModifiedSulfiteAgar)是一種用于微生物培養的培養基,具有以下特點:1.**用途**:主要用于食品中嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養和計數。2.**成分**:通常包含蛋白胨、無水亞硫酸鈉和瓊脂。具體配方為每升培養基含蛋白胨10.0克、無水亞硫酸鈉1.0克、瓊脂20.0克。3.**配制方法**:稱取31.0g培養基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,再于各試管內加入適量清潔的混鐵粉或鐵屑,不調pH,121℃高壓滅菌20分鐘,備用。4.**微生物靈敏度試驗**:按標簽用法制備培養基,接種質控菌株,放置于55℃厭氧培養48小時以驗證培養基的性能。5.**加熱滅菌**:在加熱滅菌前,培養基成分應邊攪拌邊溶解于水中。滅菌時間通常要在121℃下保持15~20分鐘,從中心溫度達到121℃開始計算。6.**儲存條件**:未提供具體儲存條件,但一般培養基應密封保存于2-25°C的環境中。7.**注意事項**:避免攝入、吸入、皮膚接觸,并確保在制備和使用過程中遵循適當的安全措施。改良亞硫酸鹽瓊脂因其特定的成分和用途,在食品衛生檢驗、醫藥、水質檢測等領域有著廣泛的應用。在冷凍保存過程中,使用保護劑如甘油、血清、糖類等,可以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害 。
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當的實驗服和手套。-準備無菌的接種環、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養基**:-按照培養基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應該仍然是液體狀態。-將冷卻的培養基倒入無菌的培養皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當的接種方法。5.**培養**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養箱中。-根據實驗要求,通常在36±1℃下培養18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養結束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
木醋桿菌的生長和纖維素的合成對pH值有一定的要求,通常在pH 5.0至6.8之間。CATC瓊脂平板
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養弧菌科細菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長的環境,高濃度抑制其他細菌生長。-蔗糖作為可發酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群生長。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應,檢測細菌產硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細菌利用蔗糖產酸會使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱取8.9g培養基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無菌平皿,備用。-注意:無需高壓滅菌。4.**不同細菌在TCBS瓊脂上的生長特征**:-副溶血性弧菌:藍綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。