芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細(xì)菌設(shè)計的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進(jìn)芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),以保證細(xì)菌的良好生長。3.**配方**:一個典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計數(shù),可以用于檢測和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時,以驗證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長情況。CVT瓊脂培養(yǎng)基主要用于乳制品中嗜冷菌的計數(shù),也可用于其他樣品中嗜冷菌的分離和計數(shù) 。卵黃氯化鈉瓊脂平板
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實驗的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶嶒灧褪痔住?準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
PK瓊脂培養(yǎng)基,也稱為Pikovskaya'sAgar,是一種用于檢測解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的原理基于解磷微生物在生長過程中能夠?qū)⒉蝗苄缘牧姿猁}轉(zhuǎn)化為可溶性形式,從而使得培養(yǎng)基中的磷酸鈣溶解,導(dǎo)致培養(yǎng)基的透明度發(fā)生變化。**配方組成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸鈣:5.0g-硫酸銨:0.5g-氯化鉀:0.2g-硫酸鎂:0.1g-硫酸錳:0.0001g-硫酸亞鐵:0.0001g-瓊脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸餾水重懸31.3g培養(yǎng)基。2.不斷攪動并加熱,煮沸1分鐘使培養(yǎng)基完全溶解。3.121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘。4.冷卻至50°C時,分裝15ml培養(yǎng)基到每個無菌培養(yǎng)皿中。**培養(yǎng)條件**:-通常在35°C下培養(yǎng)48小時。**觀察指標(biāo)**:-在PK瓊脂培養(yǎng)基上生長的解磷微生物菌落周圍的培養(yǎng)基由不透明變透明,通過觀察培養(yǎng)基的透明度變化來判斷微生物是否具有解磷能力。**保存條件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。這種培養(yǎng)基在土壤微生物學(xué)、植物病理學(xué)和環(huán)境微生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,特別是在研究植物-微生物相互作用以及微生物對土壤養(yǎng)分循環(huán)的貢獻(xiàn)方面。
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。它的特點包括:1.**成分**:TYC培養(yǎng)基通常包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:TYC培養(yǎng)基用于血鏈球菌的分離,可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加選擇性;也用于制備變形鏈球菌分離培養(yǎng)基。4.**配制方法**:稱取本品98.0g于1L蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后在121℃高壓下滅菌15分鐘,滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試,可以確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長。6.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在陰涼干燥處。7.**結(jié)果觀察**:在TYC培養(yǎng)基上,可以觀察到細(xì)菌的生長情況,用于進(jìn)一步的鑒定和分析。TYC培養(yǎng)基因其高選擇性和特異性,是檢測口腔中鏈球菌污染的重要工具。TGC液體培養(yǎng)基不僅用于無菌試驗,還可用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌總數(shù)的測定。
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)是一種專門用于培養(yǎng)支原體的培養(yǎng)基,它包含精氨酸作為生長因子,適用于那些需要精氨酸才能生長的支原體,如口腔支原體等。以下是該培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:通常包含豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖、L-精氨酸和酚紅等成分。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末,按照說明書比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸餾水中。-加熱溶解并調(diào)節(jié)pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至室溫后,無菌操作下加入滅活小牛血清或馬血清(通常為200mL)和青霉素(通常為80萬單位)。-混勻后分裝到無菌試管中備用。3.**用途**:主要用于藥品和生物制品中支原體的檢測,特別是口腔支原體的培養(yǎng)和檢測。4.**培養(yǎng)條件**:通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)7-14天。5.**觀察指標(biāo)**:培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,支原體生長時會因代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基的pH值,導(dǎo)致顏色變化。例如,口腔支原體分解精氨酸產(chǎn)堿,使培養(yǎng)基顏色由橙色變?yōu)榧t色。6.**質(zhì)量控制**:通過接種已知的質(zhì)控菌株來驗證培養(yǎng)基的靈敏度和有效性。除了用于血液和無菌體液標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng),血液增菌培養(yǎng)基還可用于動物性食品中致病菌的檢測研究。CW瓊脂 含卡那霉素培養(yǎng)皿
不同細(xì)菌在TSFA上的生長特征不同,如金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生黃色的色素,大腸埃希氏菌形成無色透明大菌落。卵黃氯化鈉瓊脂平板
NGKG瓊脂基礎(chǔ)是一種用于食品中蠟樣芽孢桿菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化鈉、甘氨酸、苯酚紅和瓊脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持滲透壓;甘氨酸提供氮源;苯酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。2.**pH調(diào)節(jié)**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加物**:在冷卻至50℃左右時,需要加入20%卵黃液100mL(卵黃液制備:取無菌卵黃液20mL,生理鹽水80mL,混勻)。卵黃液提供卵磷脂,產(chǎn)卵磷脂酶的細(xì)菌可水解卵磷脂,使其菌落周圍形成一個白色的沉淀環(huán)。5.**抗生物質(zhì)**:每200mL培養(yǎng)基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革蘭氏陰性細(xì)菌生長。6.**用途**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)主要用于食品中蠟樣芽孢桿菌的分離培養(yǎng)。7.**培養(yǎng)特征**:在30℃±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時后,典型的蠟樣芽孢桿菌在NGKG瓊脂基礎(chǔ)上表現(xiàn)為淺紅色菌落,邊緣不規(guī)則,有卵磷脂沉淀環(huán)。8.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來驗證培養(yǎng)基的質(zhì)量。 卵黃氯化鈉瓊脂平板