尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測和分離細菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產(chǎn)生脲酶的細菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調(diào)節(jié)pH至7.2,過濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細菌的脲酶檢測。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時。5.**觀察指標(biāo)**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當(dāng)細菌產(chǎn)生的脲酶分解尿素產(chǎn)生氨時,培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期三年。7.**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)在無菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在檢測和研究能夠分解尿素的細菌方面。海藻糖-脯氨酸培養(yǎng)基被推薦用于稀有放線菌的分離培養(yǎng)基,因為它有助于提高稀有放線菌的出菌率 。堿性膽鹽瓊脂平板
嗜鹽菌選擇性瓊脂是一種專門用于分離和培養(yǎng)嗜鹽菌的培養(yǎng)基,其特點和應(yīng)用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化鈉:40.0g/L-結(jié)晶紫:0.0005g/L-瓊脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生長。-高含量的氯化鈉創(chuàng)造高滲環(huán)境,有利于嗜鹽菌的生長,同時抑制不耐高鹽的細菌。-結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽性菌的生長。-瓊脂作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體。-高pH值有助于抑制部分雜菌的生長。3.**配制方法**:-稱取77.0g培養(yǎng)基粉末,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中。-分裝后,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**使用方法**:-將培養(yǎng)基傾注成平板,待凝固后使用。-接種樣品后,放置于36±1℃恒溫培養(yǎng)箱中需氧培養(yǎng)18-24小時。5.**細菌生長特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:無色菌落,較濕潤。-溶藻弧菌ATCC17749:無色菌落。-金黃色葡萄球菌ATCC25923:抑制生長。6.**微生物靈敏度試驗**:-按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時。-回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。卵黃氯化鈉瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。
四號瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強其生長。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細菌設(shè)計的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),以保證細菌的良好生長。3.**配方**:一個典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計數(shù),可以用于檢測和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時,以驗證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長情況。哥倫比亞肉湯能夠支持包括細菌、酵母和霉菌在內(nèi)的多種微生物的生長,尤其適合培養(yǎng)營養(yǎng)要求高的微生物。
DCR培養(yǎng)基是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,它支持植物細胞、組織的生長和發(fā)育。以下是DCR培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-包含大量元素(如硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、微量元素(如硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、碘化鉀等)、鐵鹽(如硫酸亞鐵、EDTA二鈉)和有機物(如鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、甘氨酸、肌醇)。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末1428.68mg/L,溶于1000ml蒸餾水或去離子水中。-加入1ml/L的1000×鈣濃縮液。-使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至5.8-6.2。-115℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:-主要用于植物組織培養(yǎng),包括細胞、組織的生長和發(fā)育。4.**保存條件**:-2-8°C保存。5.**注意事項**:-避免吸入、攝入或皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)嚴格按配方配制。-pH調(diào)節(jié)不宜過高或過低。-培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)進行無菌檢查。6.**特別說明**:-不適宜制備高濃度母液,會有沉淀產(chǎn)生。DCR培養(yǎng)基的配方是完全定義的,不含動物衍生成分,從而減少了潛在的影響和免疫反應(yīng)風(fēng)險。這種培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在研究植物細胞重編程、干細胞和組織工程等領(lǐng)域。巴氏芽孢桿菌的芽孢因其高抵抗力和在惡劣條件下存活的能力,在生物技術(shù)領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用潛力。改良BPLS瓊脂培養(yǎng)皿
在冷凍保存過程中,使用保護劑如甘油、血清、糖類等,可以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害 。堿性膽鹽瓊脂平板
胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)是一種常用的微生物固體培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種細菌的分離和培養(yǎng)。以下是TSA培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點:1.**成分**:TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化鈉(5g/L)和瓊脂(15g/L),這些成分為細菌提供氮源、維生素、生長因子以及維持滲透壓和凝固培養(yǎng)基。2.**pH值**:TSA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.3±0.2(25℃),以滿足大多數(shù)細菌生長的需要。3.**用途**:TSA培養(yǎng)基適用于多種細菌的培養(yǎng),包括非選擇性增菌培養(yǎng)及用于阪崎腸桿菌的純化培養(yǎng)和產(chǎn)黃色素試驗。4.**制備方法**:將TSA培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解,通常分裝到試管或平皿中,經(jīng)過高壓滅菌后備用。5.**保存條件**:未開封的TSA培養(yǎng)基通常在室溫下避光保存,保質(zhì)期可達三年。開封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長保存期。6.**注意事項**:在稱量和操作過程中應(yīng)注意無菌操作,避免微生物污染。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。粉塵可能引起呼吸道不適,操作時應(yīng)佩戴口罩。7.**應(yīng)用**:TSA培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測和環(huán)境保護等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。堿性膽鹽瓊脂平板