1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的逆轉錄酶（ReverseTranscriptase,RT）具有一個關鍵特性：它們通過特定的突變消除了RNaseH活性。RNaseH是一種通常與某些逆轉錄酶相關的酶活性，它能夠降解RNA。然而，在1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中，逆轉錄酶被設計成不具有這種降解RNA的能力，從而在合成cDNA的鏈時保護RNA模板不被降解。以下是1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中逆轉錄過程的一般步驟，以及如何避免RNA降解：1.**RNA模板準備**：首先確保RNA模板的純度和完整性，避免DNA污染。可以通過DNaseI處理去除RNA樣品中的DNA污染。2.**混合反應組分**：將RNA模板、dNTPs（去氧核苷酸三磷酸）、逆轉錄引物（如oligo(dT)或隨機引物）和緩沖液混合。3.**逆轉錄酶添加**：加入經過突變處理的逆轉錄酶，這種酶缺乏RNaseH活性，因此不會在合成過程中降解RNA。4.**逆轉錄反應**：在適宜的溫度下進行逆轉錄反應，逆轉錄酶根據RNA模板合成cDNA鏈。5.**終止反應**：通過加熱至一定溫度來終止逆轉錄反應。Cas9 NLS與CRISPR/Cas9系統中的gRNA兼容，可以進行位點特異性的DNA切割 。Recombinant Mouse IGFBP-3R Protein,hFc Tag

pA-Tn5轉座酶的高活性是其重要特性之一，這種高活性主要來源于以下幾個方面：1.**轉座酶突變體**：pA-Tn5轉座酶是由Tn5轉座酶的高活性突變體構成的。這種突變體相比野生型Tn5轉座酶，在體外的轉座效率顯著提高，通常提升1000倍以上。2.**ProteinA融合**：pA-Tn5轉座酶將ProteinA與高活性Tn5轉座酶融合，這種融合不僅保留了Tn5轉座酶的高效DNA切割能力，還通過ProteinA的抗體結合特性，提高了對特定DNA序列的靶向能力。3.**轉座隨機性**：pA-Tn5轉座酶能夠在整個基因組上實現隨機的DNA切割，這為高通量測序提供了廣的覆蓋度。4.**穩定性**：高活性的pA-Tn5轉座酶在各種實驗條件下都能保持穩定，包括在不同的溫度和pH值條件下。5.**插入位點易測序**：pA-Tn5轉座酶產生的DNA片段具有明確的插入位點，這些位點容易被高通量測序技術識別和分析。6.**高效片段化**：在CUT&Tag等實驗中，pA-Tn5轉座酶能夠高效地實現目標蛋白結合DNA的片段化，為后續的測序和分析打下基礎。7.**低細胞投入量**：由于其高活性，pA-Tn5轉座酶允許從極少量的細胞中進行實驗，如單細胞水平的研究。

重組酶聚合酶擴增技術（RecombinasePolymeraseAmplification，簡稱RPA）是一種核酸擴增技術，能夠在等溫條件下快速檢測特定DNA序列。這項技術以其快速、靈敏度高、特異性強、對設備要求低等優點，在臨床快速診斷、食品檢測、防控、工業應用、現場實時檢測等領域具有廣泛的應用潛力。**技術原理**：RPA技術主要依賴于幾種關鍵的酶和蛋白質：-**重組酶**：能夠識別并結合到單鏈核酸（寡核苷酸引物）上。-**單鏈DNA結合蛋白（SSB）**：與被置換的單鏈DNA結合，防止其重新結合形成雙鏈。-**鏈置換DNA聚合酶**：在引物定位同源序列后，進行鏈延伸，實現DNA的指數增長。RPA的工作原理是，重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發生鏈交換反應形成并啟動DNA合成，對模板上的目標區域進行指數式擴增。整個過程進行得非常快，一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。**技術優勢**：-**快速性**：RPA可以在37-42°C的等溫條件下快速完成核酸的擴增，通常在10到30分鐘內即可完成。-**靈敏度和特異性**：RPA能夠檢測低至單拷貝的核酸模板，并具有高特異性。

    Lambda核酸外切酶（LambdaExonuclease）高度特異性地作用于5'端磷酸化的雙鏈DNA主要通過以下幾個方面實現：1.**結構特異性識別**：Lambda核酸外切酶具有識別特定DNA結構的能力，特別是5'端磷酸化的雙鏈DNA。這種識別能力通常由酶的活性位點結構決定，能夠與5'-磷酸基團形成特定的相互作用。2.**酶活性位點**：酶的活性位點含有氨基酸殘基，這些殘基能夠與5'-磷酸基團形成氫鍵或其他非共價相互作用，從而穩定酶與DNA的結合。3.**切割機制**：Lambda核酸外切酶通過水解5'-磷酸二酯鍵來降解DNA鏈。它從5'端開始，逐個移除核苷酸，直到遇到非5'-磷酸化的末端或遇到結構上的障礙。4.**低活性對非特異性底物**：對于5'-羥基（OH）末端的DNA或單鏈DNA，Lambda核酸外切酶的活性降低，因為這些底物缺乏與酶活性位點結合所需的特異性相互作用。5.**酶動力學**：Lambda核酸外切酶對5'-磷酸化雙鏈DNA的酶動力學參數（如Km和Vmax）與對非特異性底物的參數有差異，這反映了其對特異性底物的高親和力和高催化效率。6.**過程性（Processivity）**：一旦Lambda核酸外切酶結合到特異性底物上，它可以連續移除多個核苷酸，而不需要頻繁地與底物解離和重新結合，這增加了酶的效率。來源于Francisella tularensis：FnCas12a是一種來源于Francisella tularensis菌株的核酸內切酶。

DNaseI是一種使用的酶，它能夠水解單鏈或雙鏈DNA，產生5'端為磷酸基團的二核苷酸、三核苷酸或更短的寡核苷酸片段。這種酶的活性依賴于鈣離子，并且可以被鎂離子或二價錳離子啟動。在鎂離子存在的情況下，DNaseI可以隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；而在二價錳離子存在時，它可以在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端或1-2個核苷酸突出的粘末端。DNaseI的一個特點是它不含RNase活性，因此可以用于處理各種RNA樣品，而不會對RNA造成降解。DNaseI的應用非常廣，包括但不限于：-制備不含DNA的RNA樣品；-在RT-PCR反應前去除RNA樣品中可能的DNA污染；-體外RNA聚合酶催化的RNA轉錄后去除DNA模板；-進行DNaseI足跡實驗研究DNA-蛋白質相互作用；-缺口平移(nicktranslation)；-產生DNA隨機片段文庫；-在細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作為陽性對照。DNaseI通常從牛胰腺中純化得到，其分子量約為32kDa（單體）。活性定義為在37℃、10分鐘內，能夠完全降解1μgpBR322質粒DNA所需的酶量。在實驗中，DNaseI的活性單位通常以Kunitz單位來表示，該單位是基于特定條件下酶降解DNA的能力來定義的。分子膠降解劑通過誘導不同的Ub連接酶與目標蛋白之間的相互作用來促進目標蛋白的降解。Recombinant Human FGF-10/KGF-2 Protein

可以利用現有的計算工具，如CRISPR design tools，預測gRNA的活性和特異性，以輔助實驗設計 。Recombinant Mouse IGFBP-3R Protein,hFc Tag

5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶通常被稱為腺苷酰化酶(Adenylase)，這種酶能夠催化5'端磷酸化的單鏈DNA或RNA（pDNA或pRNA）轉換成5'端腺苷酰化DNA或RNA（AppDNA或AppRNA）。根據搜索結果，該酶的來源是嗜熱古細菌，在大腸桿菌中進行表達并純化而獲得。這種酶在反應中將ATP分解成AMP和PPi，然后將AMP轉移到單鏈DNA的5'磷酸基團上，形成腺苷酰化單鏈DNA，從而制備出腺苷酰化接頭(linker)。此外，一些5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶是MthRNA連接酶（例如NEB#M2611A），這種酶也用于生成高產量的5'腺苷酰化DNA，并且操作簡便，具有超過95%的效率，無需凝膠純化即可完成單步反應。MthRNA連接酶是一種已知能夠在65℃下有效工作的酶，有助于避免DNA的二級結構對腺苷酰化反應的干擾。這些酶的高效率和特異性使得5'DNA腺苷酰化試劑盒在單鏈DNA的5'端腺苷酰化修飾中非常有效，常用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測序建庫或PCR檢測等應用中。Recombinant Mouse IGFBP-3R Protein,hFc Tag