PreScissionProtease(PSP)是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。它具有以下特點:1.**特異性識別**:PreScissionProtease能在低溫下(4°C)特異識別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進行酶切。2.**依賴結構**:底物的識別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級結構,還依賴于融合蛋白的二級和三級結構。3.**分離GST標簽**:它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達出的帶有酶底物識別多肽序列融合蛋白的GST標簽進行分離。4.**表達宿主**:本品由大腸桿菌中重組表達,并以無菌液體形式提供。5.**物理性質**:分子量約為46kDa,物理外觀為無菌無色液體。6.**儲存緩沖液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切緩沖液**:10×酶切緩沖液為500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**純度**:經SDS-PAGE及HPLC分析,純度大于95%。9.**酶活定義**:在5℃條件下反應16小時,能夠切割10μg的GST標簽的融合蛋白達90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。牛痘DNA拓撲異構酶I的反應溫度為37°C。在這個溫度下,酶的活性高,能夠有效地進行DNA的切割和連接。Recombinant Human TFF3
EndoS糖苷內切酶S在抗體藥物偶聯物(ADCs)研究中的應用主要體現在糖鏈定點偶聯技術上。通過上海藥物所的研究,開發了一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略,利用EndoS2這種糖苷內切酶,可以將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體的糖基化位點,實現了糖鏈定點ADC化合物的制備。定點偶聯技術相比傳統的隨機偶聯具有更好的方法指數,能夠提高ADC的均一性和穩定性,是當前ADC領域的研究熱點之一。在抗體的Fc結構域N297位,這是一個保守的糖基化位點,通過在該位點引入細胞物質,可以形成具有優勢的糖鏈定點ADC化合物(glycosite-specificADCs,gsADCs)。此外,EndoS2對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,能夠高效獲得功能修飾的糖工程抗體,并且可以用于抗體的內吞成像研究及糖鏈延伸等功能化研究。研究人員通過這種“一步”制備策略得到的糖鏈定點ADC化合物,在結構均一性、親水性、體外穩定性以及體外活性方面表現良好,并且在體內瘤抑制活性方面,相比陽性對照ADC化合物,在低載藥量的情況下具有更強的抑制效果。EndoS酶的這些應用,不僅展示了其在簡化ADC制備流程中的潛力,還有助于推動定點ADC藥物的深入發展,為未來的生物藥物開發提供了新的思路和方法。Recombinant Cynomolgus PD-L1/B7-H1 Protein,hFc TagE1在ATP的存在下激發泛素分子,通過一個硫酯鍵將泛素的C末端甘氨酸殘基與E1酶的活性連接起來。
重組人血清白蛋白(rHSA)是一種重要的蛋白質,廣泛應用于生物醫學領域。植物表達的細胞培養級重組人血清白蛋白(rHSA)具有多項特點和科研應用價值:1.**高純度和安全性**:植物源重組人血清白蛋白(rHSA)通過基因工程技術在植物如水稻中表達,避免了動物源成分和血源性的病毒污染的風險,提供了一種更安全、更純凈的蛋白質來源。2.**批次穩定性**:與來源于動物的血清白蛋白相比,植物表達的rHSA提供了更高的批次間一致性和穩定性,這對于科研和工業應用中的重復性和可靠性至關重要。3.**多功能性**:rHSA在細胞培養中可以作為重要的添加成分,有助于細胞生長和維持培養環境的穩定性。它還可以作為藥物載體,疫苗保護劑、細胞凍存保護劑和醫療器械包埋劑等。4.**生物相容性**:由于rHSA的化學性質與天然HSA非常接近,它在生物醫藥生產中具有很高的生物相容性,可以用于多種藥物的配方和醫療設備。5.**科研應用**:rHSA在科研中可用于細胞培養、藥物載體研究、疫苗開發、組織工程和再生醫學等領域。6.**生產規模**:植物表達系統具有大規模生產重組蛋白的潛力,這對于滿足全球對rHSA日益增長的需求至關重要。
在生產過程中,確保大腸桿菌表達的重組抑肽酶符合GMP(GoodManufacturingPractice,良好生產規范)標準,需要遵循一系列嚴格的質量控制和生產規范措施:1.**識別關鍵物料屬性(CMAs)**:確保穩定的物料來源,明確和理解物料對制劑產品研發的影響,包括微生物學安全性和人源特異性的病毒的考量。2.**確定關鍵工藝參數(CPPs)**:識別和控制影響產品質量的工藝參數,如溫度、CO2濃度、pH等,以及生物學范疇的工藝參數,確保產品達到預期的質量屬性目標。3.**確立CPP、CMA和CQA之間的關系**:使用DOE(DesignofExperiments,實驗設計)方法開展試驗設計,確定好的的CMA和CPP組合,以獲得滿足需求的CQA輸出。4.**遵循通用技術文件(CTD)的P.2章節要求**:在藥品研發及相關信息中,詳細描述物料屬性和工藝參數對產品CQA的風險分析和相互關系。5.**生產環境和設備**:生產設備和環境必須符合相關法規要求,遵循NSFISO9001:2015質量體系,并符合GMP指導原則。6.**質量控制**:進行嚴格的質量控制,包括對產品純度、活性、蛋白含量等的檢測,確保產品符合既定的質量標準。7.儲存和運輸:按照規定的條件儲存和運輸產品,確保其穩定性和有效性,一般凍干粉在2-8℃保存,有效期為2年。
使用PreScissionProtease進行蛋白質切割時,為保證高純度和高活性,需要考慮以下關鍵因素:1.**特異性切割位點**:確保融合蛋白中包含PreScissionProtease特異性識別的序列,以實現精確切割。2.**酶與底物的比例**:適當比例的酶量對于高效切割至關重要,過多或過少的酶都可能影響切割效率和純度。3.**反應條件**:包括溫度、pH和反應時間等,這些條件需要優化以確保酶的活性和選擇性。通常,PreScissionProtease在4°C下進行酶切。4.**緩沖液兼容性**:使用與PreScissionProtease兼容的緩沖液,避免使用可能抑制酶活性的離子或化學物質。5.**蛋白濃度**:確保融合蛋白有足夠的濃度,以提高切割效率和減少樣品損失。6.**酶切后的分離**:切割后,需要有效分離目的蛋白和切割下來的標簽,通常利用親和層析等方法。7.**避免蛋白降解**:在實驗過程中添加蛋白酶抑制劑,以防止蛋白降解酶對目的蛋白的降解。8.**避免蛋白質聚集**:在切割過程中,應避免條件導致蛋白質聚集或沉淀,這可能會影響純度和活性。9.**避免氧化**:在蛋白質處理過程中,添加抗氧化劑如DTT或TCEP,以防止半胱氨酸殘基的氧化。10.**清潔的實驗環境**:確保實驗器材和環境的清潔,避免微生物污染和核酸污染。Pfu DNA Polymerase 適合擴增較長的DNA片段,有助于在基因編輯中處理大的基因區域或復雜的基因結構。Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein,hFc Tag
在cDNA末端快速擴增(RACE)技術中,Ultra-Long Master Mix 可以用來擴增5'和3'末端的長片段cDNA。Recombinant Human TFF3
酵母重組表達的PNGaseF(N-糖苷酶F)是一種用于蛋白質去糖基化實驗的酰胺水解酶,具有以下特點以確保實驗中的活性和穩定性:1.**高效性**:具有高比活性,例如750000U/mL,這有助于快速高效地進行去糖基化反應。2.**穩定性**:在含有50%甘油的儲存緩沖液中,比較好的活性和穩定性可維持長達24個月。3.**使用條件**:可以在原生或變性條件下使用,對于變性條件下的去糖基化,建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用。4.**儲存條件**:建議在-15~-25℃保存,有效期1年。5.**酶活定義**:1個酶活力單位指在10μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。6.**操作簡便**:提供了使用說明,包括變性和非變性條件下的蛋白質去糖基化步驟。7.**His標簽**:產品帶有His標簽,便于在實驗中進行純化和檢測。8.**純度**:純度達到95%以上,通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進行確定。9.**快速反應**:有些產品如FastPNGaseF,可以在數分鐘內完成徹底且無偏好性地去糖基化。10.**注意事項**:產品供科研使用,操作時應穿戴適當的實驗室防護裝備。遵循這些指導原則和產品說明,可以確保PNGaseF在實驗中的活性和穩定性,從而獲得可靠的去糖基化結果。Recombinant Human TFF3
Probe qPCR Mix (2×):高效、特異的探針法qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的即用型預混液,廣應用于基因表達分析、病原體檢測、SNP分型和拷貝數變異分析等領域。該預混液基于TaqMan等探針技術,通過熒光信號的實時監測實現對目標DNA序列的高靈敏度定量分析。產品特點高特異性和靈敏度:采用熱啟動Taq DNA聚合酶和優化的反應緩沖體系,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。快速反應:支持快速qPCR程序,可在短時間內完成檢測,提高實驗效率。防污染系統:部分產品含有dUTP/UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有...