脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間,也可參考Amicon? Pro完整操作說(shuō)明書(shū) 查看詳細(xì)信息。超濾濃縮管代理銷(xiāo)售哪家比較靠譜。普陀區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)
高通量超濾 MultiScreen?超濾膜板 MultiScreen? 超濾膜板是實(shí)現(xiàn)高通量生物樣品處理的必備工具,能配合自動(dòng)化工作平臺(tái)對(duì)樣品進(jìn)行純化、濃縮、脫鹽或分析前去除蛋白等操作。Millipore 提 供 3 種帶有低吸附超濾膜的 96 孔板,在高通量操作時(shí)樣品吸附損失小而得率高。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用: 高通量:96 孔超濾膜板和 384 孔膜板 可靠:低蛋白吸附,蛋白得率高,孔間數(shù)據(jù)均一性好 功能多樣:樣品體積 50-500μL 適用,兼容各種 96/384 孔板標(biāo)準(zhǔn)操作設(shè)備或自動(dòng)化平臺(tái) 用于高通量蛋白鑒定與篩選的濃縮、脫鹽,以及樣品分析前大分子蛋白去除 也可用于核酸(DNA/RNA/PCR 產(chǎn)物 / ***)樣品制備及二代測(cè)序樣品制備靜安區(qū)濃縮管一級(jí)代理上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。
加入漂洗緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的5倍)與樹(shù)脂混勻并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長(zhǎng)結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購(gòu)不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請(qǐng)使用目錄號(hào)ACS500024。
用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預(yù)切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來(lái)對(duì)較為稀釋的溶液進(jìn)行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結(jié)構(gòu)緊密,確保對(duì)蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規(guī)截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對(duì)于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進(jìn)行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養(yǎng)基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *膜的常規(guī)截留分子量為5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直徑分為25,44.5,47,63.5和76mm。Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽!
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過(guò)濾應(yīng)用。這種離心超濾管流速很快,設(shè)計(jì)緊湊,螺旋蓋使用起來(lái)非常方便,過(guò)濾收集管內(nèi)置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標(biāo)準(zhǔn)的50mL離心管吊籃式轉(zhuǎn)子使用 從發(fā)酵培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞裂解液中分 離低分子量溶質(zhì)上海超濾濃縮管供應(yīng)商。普陀區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)
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外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當(dāng)于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來(lái)對(duì)外泌體的干擾),請(qǐng)參考默克磁珠操作說(shuō)明書(shū)。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號(hào)信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn),相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的工具解決外泌體制備的高大上問(wèn)題,真是惠而不費(fèi),不亦樂(lè)乎?普陀區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)