加入漂洗緩沖液（體積是樹脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹脂柱床體積的5倍）與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體，在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時，可以延長結合反應時間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽！長寧區超濾濃縮管代理價

超濾（UF）常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質、電荷等多種因素影響，這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa（MW）的分子，鹽和水等小分子會透過，因此在大分子樣品處理中得到了應用。膠狀或微粒狀物質也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑，則經過膜處理可以達到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠遠大于膜孔徑，膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對于樣品更溫和，沒有發生容易導致生物大分子失活的相變，而且在濃縮的同時可以完成對溶質的除鹽。超濾的應用不限于蛋白樣品的操作，也常用于核酸樣品制備，包括分子克隆和質粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數分鐘內被濃縮，回收率達到99%以上。靜安區默克離心濃縮管代理商超濾濃縮管的系列有很多。

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾），請參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準，相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費，不亦樂乎？

通量（超濾效率）及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積，使用高 NMWL 濾膜可以增加通量，但同時 會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多，包括： 壓力：較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進行超濾時，流量隨著跨膜壓力 （TMP）的增大而增加。正壓條件下操作，如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯， 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***，通量會達到一個平臺，甚 至可能隨著壓力的增加而降低。買超濾濃縮管找益啟生物公司。

大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL；死體積設計確保樣品不會被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同，樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設計，加快處理速度；反轉離心操作進一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個產品替代傳統的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術和方法，是非常方便的工具。 特別推薦的應用： 色譜洗脫產物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細胞裂解液澄清超濾濃縮管的好處您了解多少呢？虹口區Merck離心濃縮管代理價

超濾濃縮管的好處都有很多。長寧區超濾濃縮管代理價

用超濾對分子進行分級 通過選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實際。事實上，膜的規格描述是基于截留而非通過 的性質。一項實驗中，采用 100k NMWL 濾膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但這時比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過濾膜， 75kDa 的分子截留率為 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 種成分通過膜并不像單一成分的溶液那么簡單和容易。實 踐中，如果要分離兩種大分子，它們之間的分子量差異應該達到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 規格在兩種蛋白之間，則可達到比較理想的 分離。如果蛋白溶液較為稀釋，低壓下操作也有助于達到更好的效果。長寧區超濾濃縮管代理價

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