內(nèi)生菌共生于植物內(nèi)部,要獲得內(nèi)生菌首先需要破碎植物組織。植物組織和內(nèi)生菌在形態(tài)、硬度等性質(zhì)上均有差異,想要獲得更多內(nèi)生菌基因組DNA,對(duì)裂解介質(zhì)的選擇是難點(diǎn)。2、相對(duì)于植物基因組,雖然內(nèi)生菌包括細(xì)菌,***,放線菌等不同類型微生物,但其基因組*占微小部分單獨(dú)提取內(nèi)生菌DNA比較困難,提取到的是混合DNA,通過(guò)PCR才能鑒定。內(nèi)生菌DNA提取思路:STEP1破壞植物釋放菌體;STEP2破壞菌體釋放核酸;STEP3提取DNA。有沒(méi)有合適的上海益啟,采購(gòu)?fù)寥繢NA提取的放心之選。楊浦區(qū)土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系電話
取純度。絕招四:***的硅膠柱膜及配套耗材,能特異性高效吸附核酸,比較大限度截留DNA分子,且柱容積大,可以減少結(jié)合時(shí)離心的次數(shù)。四大絕招傍身,各種類型土壤的樣本統(tǒng)統(tǒng)搞定,再讓我們看看TA在江湖上的表現(xiàn)吧。2.好不好用,數(shù)據(jù)來(lái)說(shuō)話。1.提取不同類型土壤基因組DNA收率及純度結(jié)果。含高腐殖酸有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土、水稻土、花壇土、鹽堿土、沙漠土等土壤樣本,DNA提取收率及純度結(jié)果如下表:Sample Type:Organic soil、Paddy soil、Flower嘉定區(qū)土壤DNA提取土壤DNA提取哪家好土壤DNA提取哪家靠譜?
12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,
。如果樣品中的目的微生物含有比較厚的細(xì)胞壁,可能需要額外的破碎裂解。問(wèn)題4:洗脫的DNA顏色為黃色或棕色怎么辦?解決思路:·腐殖酸含量高【1】在洗滌步驟之前,可先用4.5M-5.5M的異硫氰酸胍溶液洗滌1-2次。【2】減少樣本用量。問(wèn)題5:A260/A280比值偏低怎么辦?解決思路:·蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數(shù)。·洗滌不干凈:增加洗滌次數(shù)。問(wèn)題6:A260/A280比值高怎么辦?解決思路:·RNA含量高,可在洗脫之后的溶液中加上海益啟生物的聯(lián)系電話。
取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘; b.最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻; c.將上一步的混合液轉(zhuǎn)移至硅基DNA吸附材料,分離液體和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脫液洗脫硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR擴(kuò)增及電泳 將上步純化的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,在電泳儀中檢測(cè)DNA。 本發(fā)明具有以下有益效果: 本發(fā)明的土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,配制好土壤裂解液、結(jié)合液、漂洗液、洗脫液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入結(jié)合液之前,樣品土壤來(lái)源的二氧化硅不與DNA結(jié)合,離心分離固體顆粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入結(jié)合液,混合后轉(zhuǎn)入含有硅基DNA吸附材料中,分離液體和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫獲得純化DNA;上海益啟生物的土壤DNA提取詢價(jià)聯(lián)系方式。浦東新區(qū)土壤DNA提取哪家優(yōu)惠
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土壤中含有大量的二氧化硅成分,因此,對(duì)土壤樣品進(jìn)行DNA提取時(shí),需要考慮樣品來(lái)源的二氧化硅對(duì)DNA的結(jié)合,一旦DNA與樣品來(lái)源的二氧化硅發(fā)生結(jié)合,DNA就會(huì)隨著土壤固體顆粒物質(zhì)一起被去除。 尿液中含有一定量的DNA,可以通過(guò)多種方法提取DNA,并用于PCR檢測(cè)、STR分型檢測(cè)、二代測(cè)序分析;但是,尿液中DNA含量較低,尿液浸潤(rùn)土壤后,被土壤吸附的DNA含量更低,要針對(duì)土壤尿液進(jìn)行DNA提取,具有一定難度。 技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素: 本發(fā)明為解決上述存在的問(wèn)題,提供了一種土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,其解決技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案是: 土壤尿液DNA提取試劑盒,包括以下試劑:楊浦區(qū)土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系電話