數字PCR也叫DigitalPCR（dPCR），是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說，數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值，不受擴增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個數，能夠對起始樣本核酸分子***定量。數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應單元中，使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個單元都會對目標分子進行擴增，然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言，傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中，這也是數字PCR與其比較大的區別。數字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，歡迎您的來電哦！北京流式數字PCR

二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法，在均相溶液中，當擴增引物增加時，由于擴增引物之間的相互作用，從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增，將可降低引物間相互作用，提高擴增效率。同時還可以實現對于少量模板的有效擴增，得到更多的有效測序數據。CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證CRISPR-Cas9技術的發明，是基因編輯技術的一大突破，但如何驗證實驗是否成功，仍需要高靈敏度的檢測方法，數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測，但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。北京流式數字PCR報價數字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，讓您滿意，歡迎您的來電！

我國***擁有完全自主知識產權的微滴式數字PCR儀MiniDrop?研發成功并投入生產。這是國內***微滴式數字PCR檢測系統，能廣泛應用于醫療、農業、環境等領域，未來，采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創檢測成為可能。MiniDrop?數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數據分析軟件組成，該系統的**為微 流控微滴生成技術，采用原創性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達皮升級，檢測線性范圍達到5個數量級，各項指標均超越國內外主流產品。

目前數字PCR技術在臨床領域已經有著非常***且***地應用，例如在病原微生物檢測中的應用：HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等；在產前診斷中的應用：13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優生五項的病毒檢測等；在**靶向***相關基因檢 測中的應用：肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因擴增檢測、神經膠質瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關基因檢測為例，在**形成的超早期,會出現**細胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細胞會釋放其DNA進入外周血,因此通過分析循環血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達到**早期篩查的目的。然而此時DNA含量極低,對檢測的靈敏度和精確性要求極高，目前只有數字PCR技術可以檢測出來。另外進行個體化***時,需要對基因組樣本進行分析,此時利用數字PCR技術也能**提高結果的可信性,進而建立合理***方案。數字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，歡迎新老客戶來電！

同時，從公式也可以看出，隨著反應陽性體系數（X）的增加，體系中目標分子的拷貝數相對于X會有較大的差距，隨著X的持續增加，數字PCR結果的不確定度也隨著提高，總體來說，數字PCR陽性體系的數量不得超過總體系數量的80%。另一個方面，N的增加會使整個數字PCR體系具有較大的線性范圍，并可以提高反應的靈敏度、穩定性以及可重復性。因此，目前dPCR都需要在成本可控的情況下，增加分配的腔室數和液滴數。商業化dPCR平臺及其特點發展到現在，市面上常見的dPCR主要有兩種：微滴式dPCR（dropletdPCR，ddPCR）和芯片式dPCR（chipdPCR，cdPCR）技術。由于芯片式dPCR制造芯片的成本較高，目前微滴式dPCR正越來越受到企業的認可。數字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，有需求可以來電咨詢！北京流式數字PCR

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數字PCR檢測及分析原理在上世紀90年代就被提出來了，但是無奈受限于當時的技術條件，樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的，受到很多因素的干擾和限制；并且結果分析對于研究者來說也十分枯燥與繁瑣，因此在很長一段時間dPCR發展停滯不前。后來由于微流控技術與微納集成制造工藝的發展解決了dPCR過程中的幾個關鍵技術問題，推動了dPCR的研究與商業化的發展。目前根據dPCR樣本稀釋分配的方式，基本可分為三大類，一種是基于大規模集成微流控芯片；第二種是使用微反應室/孔板；第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式，其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或者微滴當中，每個反應器的核酸模板數少于1或者等于1。經過PCR擴增之后，有一個核酸分子的模板的反應器就會給出熒光信號，沒有模板的反應器沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積，可以推算出原始溶液的核酸濃度。北京流式數字PCR