麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkeyAgar,簡稱MAC)是一種具有中等選擇性的培養(yǎng)基,主要用于分離和鑒定革蘭氏陰性桿菌,尤其是腸道致病菌。以下是它的一些特點和用途:1.**成分**:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、胨、豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)、氯化鈉、瓊脂、乳糖、結(jié)晶紫和中性紅。這些成分共同作用,為細菌提供生長所需的營養(yǎng),同時具有選擇性和鑒別性。2.**選擇性**:膽鹽和結(jié)晶紫的添加可以抑制革蘭氏陽性菌的生長,而促進某些革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌和沙門氏菌)的生長。3.**鑒別性**:乳糖作為可發(fā)酵的糖類,與中性紅結(jié)合,可以區(qū)分發(fā)酵乳糖和不發(fā)酵乳糖的細菌。發(fā)酵乳糖的細菌會產(chǎn)生酸性環(huán)境,使中性紅從無色變?yōu)榧t色,從而形成特征性的菌落顏色。4.**菌落特征**:在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上,大腸桿菌通常形成紅色或粉紅色的菌落,而沙門氏菌和志賀氏菌則形成無色或淡色的菌落。5.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。6.**用途**:主要用于糞便、分泌物中腸道致病菌及腸球菌的分離培養(yǎng),也用于檢測或驗證水、乳品和其他材料中的大腸菌群滴度。通過進一步的生化測試,如氧化/發(fā)酵葡萄糖測試、花青素鑒定等,來進一步確認分離的菌株是否為目標腸道菌。堿性瓊脂平板
大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基(胰酪胨大豆肉湯)是一種廣泛應用于微生物培養(yǎng)的通用培養(yǎng)基,它具備以下特點:1.**成分**:該培養(yǎng)基主要由胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀、葡萄糖和亞硫酸鐵組成,其中胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、維生素和生長因子,氯化鈉維持滲透壓平衡,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,葡萄糖提供碳源,亞硫酸鐵則用于抑制非目標細菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2,以適應微生物生長的需要。3.**應用**:大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基特別適用于沙門氏菌的前增菌培養(yǎng),也適用于其他多種微生物的培養(yǎng),包括需氧菌和厭氧菌。4.**使用方法**:通常按照一定的比例稱取培養(yǎng)基粉末,溶解在蒸餾水中,經(jīng)過高溫滅菌后使用。例如,可以稱取30.0g培養(yǎng)基粉末,溶解在1000mL蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。5.**質(zhì)控**:該培養(yǎng)基可用于微生物質(zhì)控,例如接種傷寒沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌,觀察其生長情況和特征性反應,如渾濁度等。6.**儲存與保質(zhì)期**:培養(yǎng)基應儲存在干燥、避光的環(huán)境中,并在開封后立即封閉以保持其穩(wěn)定性,通常保質(zhì)期為三年。氣單胞菌鑒別瓊脂平板胰蛋白胨提供了微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),瓊脂則起到固體化培養(yǎng)基的作用。
RV沙氏增菌肉湯(RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBroth,RVS肉湯)是一種用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。它的主要特點如下:1.**成分**:RV沙氏增菌肉湯包含大豆蛋白胨、乳糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、孔雀石綠、氯化鎂、煌綠等成分,這些成分有助于抑制其他非沙門氏菌的生長,同時促進沙門氏菌的生長。2.**用途**:主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng),特別是在食品、水和牛奶等樣品中檢測沙門氏菌時。3.**配制方法**:通常需要稱取一定量的干粉培養(yǎng)基,加入指定量的蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解,然后進行高壓滅菌。4.**培養(yǎng)條件**:RV沙氏增菌肉湯通常在35-37°C的溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時間根據(jù)實驗需求而定。5.**效果**:在RV沙氏增菌肉湯中,沙門氏菌能夠良好生長,而其他一些細菌則受到抑制。6.**質(zhì)量控制**:使用時需要進行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的制備和使用符合標準操作程序。7.**儲存**:RV沙氏增菌肉湯的干粉形式應在干燥、避光的條件下儲存,通常在4-10度的環(huán)境中保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在適當?shù)膬Υ鏃l件下,RV沙氏增菌肉湯的有效期通常為三年。
曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基(EMB)是一種用于微生物培養(yǎng)的弱選擇性培養(yǎng)基,特別適用于分離腸道致病菌,尤其是大腸桿菌。以下是EMB培養(yǎng)基的幾個關(guān)鍵特點:1.**產(chǎn)品用途**:用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌。2.**實驗原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供細菌生長所需的氮源和其他營養(yǎng)元素;乳糖作為可發(fā)酵的碳源;氯化鈉維持滲透壓;曙紅鈉和亞甲基藍作為抑制劑和指示劑,在酸性條件下結(jié)合形成黑色沉淀。3.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、乳糖、亞甲基藍、曙紅鈉和瓊脂,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。4.**試驗方法**:將培養(yǎng)基粉末溶解在純化水中,121℃高壓滅菌15分鐘后備用。5.**微生物靈敏度試驗**:通過接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌、乙型副傷寒沙門菌和金黃色葡萄球菌,觀察其生長情況和特征性反應。6.**菌落特征**:大腸埃希氏菌在EMB上生長時,菌落通常呈紫黑色,有金屬光澤;而沙門氏菌等則為無色或琥珀色半透明菌落。7.**配置方法**:將成分溶解、過濾、滅菌后,加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃后加入曙紅和亞甲基藍溶液,傾注平板。這些特點使得EMB培養(yǎng)基在微生物學研究和臨床診斷中具有重要應用。VRBA也被用于監(jiān)測食品和水的衛(wèi)生質(zhì)量,以及在臨床微生物學實驗室中進行一些腸道細菌的鑒定工作。
亞硒酸鹽胱氨酸(SC)培養(yǎng)基是一種選擇性增菌培養(yǎng)基,主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。以下是其特點介紹:1.**成分**:SC培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亞硒酸氫鈉、磷酸氫二鈉和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,亞硒酸氫鈉用于抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數(shù)革蘭氏陰性腸道菌,磷酸氫二鈉作為緩沖劑,L-胱氨酸作為還原劑。2.**檢驗原理**:SC培養(yǎng)基的設(shè)計原理在于其成分能夠滿足沙門氏菌生長的需求,同時抑制其他非目標細菌的生長。3.**配制方法**:SC培養(yǎng)基的配制方法是稱取23g干粉,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解。配制過程中應避免高壓滅菌,以免影響培養(yǎng)基的有效成分。4.**使用注意事項**:SC培養(yǎng)基比較好現(xiàn)配現(xiàn)用,或在4℃下短期保存。在室溫下,尤其是夏季,培養(yǎng)基容易出現(xiàn)顏色變化,導致增菌效果減退。5.**顏色變化**:過分加熱或反復加熱會使培養(yǎng)基顏色變深,影響使用效果。因此,配制過程中只能輕微煮沸,并且要迅速用涼水冷卻。6.**保存**:開封后的SC培養(yǎng)基比較好存放于2℃-8℃環(huán)境下,以延長使用時間。TSA板常用于菌落計數(shù),通過將待測樣品在TSA板上均勻涂布,培養(yǎng)一定時間后,觀察并計數(shù)產(chǎn)生的菌落數(shù)量。SS瓊脂平板
EMB培養(yǎng)基的兩種染料是:1.艾奧辛(Eosin);2.亞甲藍(Methylene Blue)。堿性瓊脂平板
Vogel-Johnson(V-J)瓊脂基礎(chǔ)是一種用于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)選擇性分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是其特點介紹:1.**成分**:V-J瓊脂基礎(chǔ)包含明膠蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚紅、磷酸氫二鉀、氯化鋰、甘氨酸和瓊脂等成分。這些成分為細菌提供氮源、碳源、維生素以及凝固劑。2.**選擇性**:甘氨酸和氯化鋰對金黃色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而較高濃度的亞碲酸鉀可抑制多數(shù)雜菌的生長。3.**鑒別特性**:金黃色葡萄球菌能夠還原亞碲酸鉀,使菌落顯黑色,同時可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,使培養(yǎng)基變黃。4.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),適合金黃色葡萄球菌的生長。5.**使用方法**:稱取V-J瓊脂基礎(chǔ)粉末,溶解于蒸餾水中,煮沸后高壓滅菌。冷卻至45-50℃時加入過濾除菌的1%亞碲酸鉀溶液,混勻后傾注平板。6.**培養(yǎng)條件**:接種后的培養(yǎng)基通常在30-35℃下需氧培養(yǎng)24-48小時。7.**結(jié)果觀察**:金黃色葡萄球菌在V-J瓊脂上通常形成黑色菌落,周圍培養(yǎng)基變黃;而大腸埃希氏菌等非目標細菌則被抑制。8.**儲存條件**:V-J瓊脂基礎(chǔ)應在避光、陰涼干燥處儲存,使用后立即旋緊瓶蓋,以保持其有效性。堿性瓊脂平板