土壤中含有大量的二氧化硅成分,因此,對土壤樣品進行DNA提取時,需要考慮樣品來源的二氧化硅對DNA的結合,一旦DNA與樣品來源的二氧化硅發(fā)生結合,DNA就會隨著土壤固體顆粒物質一起被去除。 尿液中含有一定量的DNA,可以通過多種方法提取DNA,并用于PCR檢測、STR分型檢測、二代測序分析;但是,尿液中DNA含量較低,尿液浸潤土壤后,被土壤吸附的DNA含量更低,要針對土壤尿液進行DNA提取,具有一定難度。 技術實現(xiàn)要素: 本發(fā)明為解決上述存在的問題,提供了一種土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,其解決技術問題的技術方案是: 土壤尿液DNA提取試劑盒,包括以下試劑:土壤DNA提取助力藥物研發(fā)。寶山區(qū)土壤DNA提取土壤DNA提取聯(lián)系電話
取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;楊浦區(qū)土壤DNA提取哪家好在線詢價MP土壤DNA提取。
1.0視為提取效果良好。土壤類型:有機營養(yǎng)土100mg、花壇土100mg、鹽堿土250mg、沙漠土250mg。提取方法:自動化/手工、自動化/手工、自動化/手工、自動化/手工。DNA收率(ng/mg樣本):130.25+4.95;196.08+3.92、19.92+0.95;24.43+0.74、11.75+0.37;13.43+0.39、2.47+0.13;2.97+0.13。A260/A280:1.84+0.00;1.98+0.02、1.86+0.01;1.85+0.02、1.87+0.02;1.90+0.01、1.85士0.00;1.91+0.03。A260/A230:1.23+0.02;1.08+0.01、1
NA Kit for Soil或FastDNA Spin Kit for Soil,按照土壤試劑盒提取protocol進行。有效裂解:采用介質E,介質E中研磨珠與菌體大小,可以有效裂解各種菌體細胞。去雜提純:試劑根據(jù)微生物DNA提取而優(yōu)化設計,裂解液、雜質去除劑及漂洗液能夠針對菌體特性很好的去除影響DNA純化及下游實驗的抑制劑,能夠提取更多的微生物DNA。省時簡便:柱膜法提取操作簡單省時。·很硬或韌性的樣本,可以單獨用介質A(1169**050)代替土壤試劑盒中的介質E來裂益啟生物是土壤DNA提取的代理商。
(c)漂洗液,所述漂洗液為70-80%乙醇; (d)洗脫液,其組分為:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料為二氧化硅納米顆粒、硅膠膜、玻璃纖維膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性納米顆粒中的任意一種。 使用本發(fā)明的試劑盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步驟: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤樣品,離心分離土壤和上清液,上清液加入結合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分離硅基DNA吸附材料和液體,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫DNA;具體包括以下步驟: a.刮取含有尿液的表層土壤,烘干,上海土壤DNA提取的供應商。金山區(qū)土壤DNA土壤DNA提取哪家好
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保證提取濃度高;純:獨特的抑制物去除技術, 提高A260/230, 保障提取純度好, 提取的DNA可直接應用于下游實驗;多:完美配合自動化核酸提取儀,實現(xiàn)高通量提??;廣:多種環(huán)境土壤均能有效提取,適用性廣,與大多數(shù)核酸自動化提取儀和工作站相匹配;安:不使用酚、氯仿等有毒試劑,安全環(huán)保;【知識點】這些土壤基因組DNA提取問題,你遇到過嗎?【知識點】這些土壤基因組DNA提取問題,你遇到過嗎?問題匯總 | **試用 | 反饋有獎。大家在做寶山區(qū)土壤DNA提取土壤DNA提取聯(lián)系電話