在陰性對照(igG或mockIP)樣品中本底較高 抗體過量導致抗體與非靶蛋白結合∶ 與珠子的非特異性結合∶ 染色質的不完金裂解∶ 試劑污染∶ "無DNA" PCR反應顯示信號 DNA的較低回收率 ChIP抗體無效或較低親和力: ChIP抗體不足: 起始樣品不足: 細胞不完全溶解和無效裂解: 交聯過度: 交聯不足: 親和力較低或珠子質量較差: PCR引物: 優化抗體的濃度。 加入-個殘***步理,以除這些非特異性蛋白或添加珠子的阻斷劑。 優化取解過程,以民得介于200-100bp長度的染色質。Calbiochem抗體的報價具體是多少呢?H3抗體抗體聯系人
如果目標蛋白的種屬不包括在已檢測的種屬中,您可以通過蛋白數據庫快速檢查特異性蛋白序列。 抗體種屬來源 一抗的種屬來源在選擇二抗時有很大的作用。二抗應盡量與您的樣本物種相隔較遠。 在說明書或供應商網站上查詢已驗證的數據: 1、查看說明書或供應商網站上的驗證數據并檢查數據質量,及驗證實驗方法。 2、查看檢測的樣本為何種類型(細胞裂解液、組織勻漿=等)。 3、只使用純化重組蛋白得到的結果可能無法作為細胞或組織樣本的比較好參考!H3抗體抗體聯系人益啟生物是Sigma抗體的代理商。
例如,磷酸特異性抗體可能只與活化的磷酸化蛋白發生反應。如果您的蛋白定位在胞內,則必須對細胞進行裂解。流式細胞實驗可能要選擇識別細胞表面分子的抗體。如果您的蛋白有三級結構,且掩蓋了抗原表位,則必須對樣本進行變性,因為有些抗體無法識別自然狀態的蛋白。一些抗體只在冷凍或非固定組織中起效,而有些抗體只對經抗原修復后的石蠟切片起效。 目標蛋白的物種來源 比較好選擇明確標有目標蛋白種屬的抗體。參考抗體說明書或網站信息。
除非您正在研究組蛋白和組蛋白修飾,否則您應采用X-ChIP方案,以使您的靶蛋白與DNA的連接穩定。增加交聯時間。?蛋白G磁珠能結合更大范踐的執體,包括小鼠單克境抗體,為達到抗體選擇的比較大靈活性,我們推薦使用蛋白A/G混合物(目錄號16-663)。檢測PCR引物的效果。加入相應的時維物,必要時重新設計引物。 關于ChIP中關鍵步驟的詳細討論及實驗問題解答,請參考默克密理博染色質免疫沉淀指南(ChIP實驗指南)。 酶聯免疫吸附實驗(ELISA)Upstate抗體哪家靠譜?
在解育過程中,檢查密封蓋與平板的接觸情況。確保樣品所用的稀釋倍數在數據計算范圍內。認真遵守產品說明書中的指示(第育時間、稀釋等)。 確保樣品根據建議的樣品操作抽提、配制和貯藏(聚丙烯試管,澄清樣品的貯戴溫度為-20℃)。 多因子免疫檢測法(Multiplex) 多因子檢測是在一次分析中分析多個靶標蛋白的方法。它是生物標記物篩選和蛋白分析的創新技術,它使研究人員能夠同時考察多重細胞間或細胞內的總蛋白或磷酸化蛋白,這些蛋白涉及細胞、組織或有機體的功能。上海買CST抗體哪家靠譜?Upstate抗體抗體
益啟生物是Merck抗體的代理商。H3抗體抗體聯系人
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