關閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運行連續(xù)添加30 mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15 mL)。重復洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點,并與適當?shù)臋z測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對于MultiBlot),5 mL(對于Mini blot)或10 mL(對于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標準免疫檢測過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座益啟生物公司帶您了解細胞分析儀詳情。金山區(qū)Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器規(guī)格
疫檢測對照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細胞裂解液(10-0.63 ug)被轉(zhuǎn)移到Immobilon8-P膜上。印跡被阻止補充有0.5%脫脂奶粉(NFDM)的Tris緩沖鹽水含0.1%Tweeno 20表面活性劑(TBST),并用一級抗B-Tubulin進行探測(MAB3408)和次級HRP偶聯(lián)的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。維護SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)清理去除協(xié)議每次使用時應清潔SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)。清理去除鹽堿中的鹽或污染物和管道,抽吸真空并通過系統(tǒng)沖洗散去的水。注:請勿對SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)進行高壓滅菌。可以拆卸框架,并用中性清潔劑洗滌,然后用蒸餾水徹底沖洗。風干。要拆卸框架,請使用右側(cè)的藍色夾子調(diào)整框架的方松江區(qū)Merck細胞計數(shù)器Merck儀器聯(lián)系方式益啟生物是默克細胞計數(shù)器的代理商。
P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個4x 30 mL每個4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計算免疫檢測所需的抗體量時,三個要素對于成功檢測出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級和二級抗體濃度●檢測試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學發(fā)光檢測試劑進行了測試。對于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標準免疫檢測中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標準免疫檢測中一抗稀釋的實例 SNAPi.d.?2.0免疫檢
向。松開框架,并同時使用雙手,像書一樣打開它,同時輕輕地將左半部分向下推,右半部分向上推。當框架是幾乎完全打開,兩半將滑開。注意不要丟掉位于其中一個的小O形圈中心銷的位置。 。要重新組裝框架,請按照與上述相反的步驟進行操作。可能需要更多的力才能使兩者接合由于O形圈已被壓縮,因此可將其減半。注意:此0環(huán)的目的是在將印跡放入框架中時保持框架蓋處于打開狀態(tài)。這框架沒有0環(huán)就可以正常工作。組件重用吸盤支架和抗體夾盤只一次性使用。重復使用會增加污點固定器堵塞的風險印跡中信號不均勻,以及樣品交叉污染。請參閱適用的國際,聯(lián)邦,州和地方法規(guī),以進行適當處置。 故障排除癥狀原因糾正措施真空控制旋鈕棒_清潔不足用灑水沖洗系統(tǒng)。吸盤座不能倒空真空度不足確保系統(tǒng)和真空之間的管道連接或何時緩慢排空來源是安全的。真空M質(zhì)量有保障的超濾杯在哪里買您知道嗎?
2.0系統(tǒng)計算SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)所需的抗體濃度用于標準免疫檢測的濃度標準SNAP i.d.o 2.0免疫檢測免疫檢測多印跡迷你印跡Midi污點_Ab濃度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗體量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗體量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比較終抗體稀釋1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗體庫存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每種抗體都是只有一個的,并且檢測試劑的靈敏度各不相同,因此可能有必要進行調(diào)整抗體或抗原濃度,使用的檢測試劑的類型或靈敏度或印跡X射線曝光時間。請注意,本指南只作為開發(fā)比較終抗體的起點濃度以獲得所需的性能。表2.封閉,抗體和洗滌的建議體積SNAP i.d.o 2.0SNA上海益啟生物細胞分析儀訂購方便。金山區(qū)Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器規(guī)格
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使用,從單細胞到復雜細胞模型的每一步,參與細胞生長的每一步,用于測量Millicell插入式細胞培養(yǎng)皿中的細胞膜電壓和跨上皮細胞電阻(Transepithelial electrical resistance,TEER),主要用于藥物轉(zhuǎn)運等的相關研究。 必殺技:可鹽可甜 電阻讀數(shù)不受膜電容和膜電壓影響;系統(tǒng)采用交流電,避免了對組織產(chǎn)生不利影響;在電極上不會有金屬沉淀;細胞上零凈電荷消除了直流電流在細胞膜上的不利影響。使用時只需要將電阻儀插入到細胞培養(yǎng)的模型上即可完成檢測。 實力概覽 來自過濾名門Amicon ?家族,高音細膩,High C仍有區(qū)分度。能夠?qū)Τ跏紳舛雀哌_10%的大分子溶質(zhì)的溶液進行高流速操作,具有高回收率,精細的對大分子物質(zhì)DNA、RNA、蛋白等進行有效分離。 必殺技1:全音域金山區(qū)Merck微流控細胞芯片分析儀Merck儀器規(guī)格