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Westem HRP基材。高背景分鎖不足更改為不同的阻止解決方案。吸筆架不夠濕組裝前，先將吸墨紙架弄濕。阻塞解決方案可能有始終準備新鮮的0.5％脫脂/低脂干奶。降級的抗體濃度過高降低抗體的濃度。吸筆架朝上放置將印跡架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗滌不足進行至少4次每次30 mL的洗滌。添加清洗劑時，確保真空連續運行緩沖。整個系統電平不一致的信號確保系統在平坦的水平表面上。污點抗體不均勻補充封閉液和抗體稀釋劑遍及整個表面0.1％Tween 20表面活性劑。吸墨紙架使用小量移液器（例如5毫升），慢慢散布整個印跡中的抗體。應用至少2.5 mL（用于MultBlot），5 mL（用于Mini blot）或10 mL（用于Midi印跡）抗體。抗體體積低沒有抗體回收盤確保抗體中的孔，回收托盤algn虹口區Merck細胞跨膜電阻儀Merck儀器規格上海益啟生物的電阻儀詢價公司電話。

中移出并在恒定的溫度下孵育顫抖。如果需要過度保溫，建議冷藏。雖然表面上的污點支架可能看起來部分干燥，印跡不會變干，因為溶液包含在框架中。注意：如果長時間處理多個印跡，則可以堆疊印跡固定框架減少工作空間。可選：如果要回收一抗，請先將抗體回收盤放入底座，然后再繼續執行步驟4。4.延長孵育時間后，將框架放回底座上，卸下蓋子，然后按照步驟8進行操作。通用議定書第12條。注意：SNAP i.d不需要延長二抗的孵育時間。 2.0系統。建議使用5倍濃度的二抗，持續10分鐘。抗體回收1.執行《通用議定書》的步驟1至5，但將真空時間增加到2分鐘，以確保所有的封閉溶液都已從框架的凹槽和通道中移除。2.從底座上取下印跡固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有殘留液體。紙巾。3.將抗體收集盤放入底座，確保抗體上的定

關閉真空。同樣，溶液將被吸收到印跡架中，并且表面可能看起來干燥。重要提示：孵育10分鐘后，再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘，直到框架完全空了。真空運行連續添加30 mL洗滌緩沖液（對于MultiBlot為15 mL）。重復洗滌步驟3次（共3次）4次洗滌）。12.關閉真空，然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點，并與適當的檢測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白，則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育：一小時至過夜1.執行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL（對于MultiBlot），5 mL（對于Mini blot）或10 mL（對于Midi blot）1X一抗（濃縮液）通常在標準免疫檢測過程中使用）。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話，將其從底座哪家WB實驗加速器是有正規授權的？

潤濕印跡。，對于大多數應用和大多數抗體而言，0.5％的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意：請勿使用濃度高于0. 5％的干奶，因為它可能會導致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液，請參閱表5了解兼容性和推薦濃度。●在洗滌，封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1％Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力，并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系統中的免疫檢測時間很短，因此建議在開始操作之前應準備一抗和二抗稀釋液。●MultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL，Mini blot固定器為5 mL，10 mL用于Midi印跡固定器。，每次需要洗30次（MultiBlot為15毫升），以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。上海益啟生物樣本制備儀訂購方便。青浦區Merck儀器咨詢報價

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