PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,全網(wǎng)優(yōu)惠的土壤DNA提取在哪里購買?徐匯區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取咨詢報價
NA Kit for Soil或FastDNA Spin Kit for Soil,按照土壤試劑盒提取protocol進(jìn)行。有效裂解:采用介質(zhì)E,介質(zhì)E中研磨珠與菌體大小,可以有效裂解各種菌體細(xì)胞。去雜提純:試劑根據(jù)微生物DNA提取而優(yōu)化設(shè)計,裂解液、雜質(zhì)去除劑及漂洗液能夠針對菌體特性很好的去除影響DNA純化及下游實驗的抑制劑,能夠提取更多的微生物DNA。省時簡便:柱膜法提取操作簡單省時。·很硬或韌性的樣本,可以單獨用介質(zhì)A(1169**050)代替土壤試劑盒中的介質(zhì)E來裂浦東新區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取規(guī)格實驗室用的土壤DNA提取推薦購買什么品牌?
8000rpm離心1分鐘,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例2 以硅膠膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有硅膠膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)
土壤微生物研究。土壤中微生物的種類較多,有細(xì)菌、***、放線菌、藻類和原生動物等,土壤微生物對土壤的形成發(fā)育、物質(zhì)循環(huán)、肥力演變以及地表植物等均有重大影響,但科學(xué)家們目前對于土壤微生物的認(rèn)識、了解和利用還都很有限,大多數(shù)土壤微生物未知種群蘊藏著目前還無法估量的資源。目前對土壤微生物的研究,主要在于研究土壤微生物多樣性、構(gòu)建宏基因組文庫、對土壤結(jié)構(gòu),成分,功能和地表植被的影響、以及分離篩選有明確功能的.土壤DNA提取哪家正規(guī)可靠?
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·樣品用量太多:雜質(zhì)和腐殖酸含量過高的樣品,可使得當(dāng)降低樣品的用量·樣品中含有二價金屬離子:可在裂解液中加入EGTA。MP Bio土壤試劑盒。MP在研究土壤樣本DNA純化方法的過程中,針對土壤樣本核酸純化的三大難題:腐植酸含量高、微生物裂解難,難以高通量提取,給出了針對性的解決方案,推出了三種土壤基因組DNA提取試劑盒,具有以下特點:1、獨特的抑制物出去技術(shù),保證提取純度好。2、完美配合自動化核酸提取儀,實現(xiàn)高通量提取徐匯區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取咨詢報價