無血清細胞凍存液細胞復蘇步驟：1.從-80℃取出凍存細胞，立即放入37℃水浴鍋快速解凍。2.待細胞混合液徹底解凍融化后，立即加入1ml細胞培養基，混合。3.將混合液移至含有約5ml該細胞培養基的離心管中，1000rpm，5min離心，棄掉上清，獲取細胞沉淀。4.加入適量的新鮮細胞培養基，輕柔混勻，并將混合液轉移至培養容器，觀察細胞狀態正常后，進行后續細胞培養工作。注意事項：1.細胞在加入凍存液分裝后，應減少在外存放時間，盡快移入到-80℃較低溫冰箱。2.對于干細胞（ES細胞）等凍存時，建議在使用前對所凍存的胞進行1周以上的試驗性細胞冷凍保存培養，確認性能后再進行正式凍存。3.本款細胞凍存液含有10%DMSO，部分對DMSO敏感的細胞，建議對其進行至少1周的本產品試驗性的細胞凍存培養，確認性能后再正式凍存。從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。青島無血清細胞凍存液

復蘇方：法1）從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4）清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5）加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6）鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。廣州正規無血清細胞凍存液廠家供應無血清細胞凍存液產品性能：通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成。

細胞凍存是將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，利用凍存技術可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。目前現有技術中，細胞凍存液中的主要成分有10％二甲基亞砜(DMSO)、20％～90％胎牛血清(FBS)、剩余組分為完全培養基。培養基以及FBS可為細胞提供必要的營養物質。DMSO是一種滲透性保護劑，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，從而達到降低細胞損傷的保護效果。但FBS屬于動物源性物質，成分比較復雜，在臨床應用上存在潛在的風險，也增加了污染的幾率，并且由于凍存液中含有動物血清，會導致凍存液的成分存在不穩定的因素。

細胞凍存：就凍存細胞而言，為了防止細胞在溫度下降時產生胞內細微冰晶，其溫度的下降不能太快。標準的操作是每一分鐘下降一度。有以下三種建議：（1）優先推薦使用程控降溫儀。（2）其次，加有異丙醇的細胞凍存盒，基本上也可以保證每分鐘1℃左右的降溫速度；（3）還有一些普遍的簡易凍存方法。如4℃半小時，-20℃半小時，然后-80℃過夜，再放入液氮；用泡沫盒（裝15mL離心管的那種）加一個保鮮袋，直接放在-80℃凍存；也可以用紗布做成袋子，將細胞懸掛在液氮上方，隔天轉入液氮；在凍存管外面包上棉花，直接放在-80℃冰箱就能夠達到緩慢降溫的效果；有的時候如果確實比較緊急的話，向96孔凍存盒的內部加滿自來水，再將凍存管放置孔中，直接置于-80℃，這樣也能夠達到緩慢降溫的目的。無血清細胞凍存液產品特色：各批產品之間有更高的產品質量一致性。

細胞凍存注意事項：1、細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml－15m培養液，而在我的試驗中的經驗總結為培養基越少細胞越容易貼附。2、復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。3、加培養基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度，從如果你加培養基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是1％。所以如果你的凍存液的濃度是10％DMSO的話那么加10ml以上的培養基就恰好稀釋到了無害濃度無血清快速細胞凍存液：含動物來源的血清成分，能夠有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。青島正規無血清細胞凍存液廠家推薦

無血清細胞凍存液產品特色：獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率。青島無血清細胞凍存液

細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清，可以現用現配。除了這個方式，還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清，配成兩倍的儲存液，在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用，特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環境中保存。使用細胞凍存液需要注意以下幾點：1、在使用凍存液前，需要確保細胞凍存液已經完全融化，并要輕輕的混勻。對融化后的細胞凍存液要置于4℃的環境中保存。2、使用凍存液之前應該確保凍存前的細胞生長情況比較良好，比如說細胞需要處于對數生長期，并且凍存的時候存活率大于90%。3、在使用細胞凍存液期間，為了保證可以發揮較佳的效果，建議將細胞凍存在液氮之中，這樣可以長時間的進行保存。如果說將細胞置于-80℃的環境下保存，那么保存的時間大約為1年。4、細胞凍存液如果需要做標記的話，要使用耐受有機溶劑的馬克筆進行標記，以防被酒精或異丙醇等擦掉，不能辨識。青島無血清細胞凍存液