鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。3.稀釋一定數量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養瓶。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細胞前用無菌的水漂洗。利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。南昌鼠尾膠原直銷價
膠原的立體結構與一般的球狀蛋白質完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉的螺旋,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,并側向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區,這些極性區能和重金屬離子結合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結構。無錫深圳鼠尾膠原鼠尾膠原蛋白用于生產明膠并添加到布丁和棉花糖中。
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:顧名思義,鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質。膠原蛋白是一種蛋白質,能幫助連接皮膚,骨頭和肌腱等身體組織。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,可用于化妝品,工業和食品生產等領域。它在實驗室中也有一定用途,因為它幾乎是純膠原蛋白。在食品加工領域,鼠尾膠原蛋白用于生產明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當作酸奶,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺和質地。它還用于生產膳食保健品,據說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進關節健康。
鼠尾膠原是一種天然培養基和一種天然的黏附劑,可用于細胞培養皿的包被,特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養;也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環境中生長。制備鼠尾膠原方法:1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘;2、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱;3、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡;4、重復步驟2、3,直至尾腱量夠用;5、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克);6、將尾腱置于平皿內剪碎,轉移至三角燒瓶中;7、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液;8、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期;9、離心,4000轉/分,10-15分鐘;10、吸取上清,分裝成小瓶,4℃保存。膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養器皿,培養一些在普通細胞培養器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環境,使細胞在三維環境中生長。1,在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長。1mg/ml濃度以上,pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內正常生長、PC-12細胞在三維膠表面正常生長。使用方法:1、細胞培養器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應的培養器皿中。鼠尾膠原醋酸溶解:在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。上海鼠尾膠原廠家批發價
鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗長時程的記錄。南昌鼠尾膠原直銷價
詳細步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.將尾巴剪開、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),抽出銀色的尾鍵;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,0.1%消過毒的醋酸中,4℃放置,并不時振蕩;4.48h后取上清,4000轉離心30min后,取上清;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存。有時可繼續向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,重復以上步驟,以制備更多的鼠尾膠。在使用時,先將冰存的膠原液在室溫下解凍,再按以下步驟包被培養器皿:1)用吸管吸取膠原液,在無菌的培養器皿的生長面內壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液。2)若包被的是培養瓶,可向培養瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內后,即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞。若為培養皿或板的話,可將培養皿或板放在已消毒的飯盒內,將浸有氨水的棉球放入飯盒內,蓋緊飯盒蓋,四周用封口膠封死。南昌鼠尾膠原直銷價
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。B.含細胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適...