利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白，并重構成膠原纖維。然后，將重構后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d，通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構成膠原纖維，并且具有特征性的D-Band結構。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維，膠原纖維部分礦化；礦化6d后，膠原纖維內部完全礦化，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構成膠原纖維，經礦化可形成與人類自體骨組織化學成分和分子結構一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。膠原蛋白是一種蛋白質，能幫助連接皮膚，骨頭和肌腱等身體組織。溫州鼠尾膠原廠家直銷

含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul10xPBS或10x培養液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。天津正規鼠尾膠原單價制備鼠尾膠原：重復步驟2、3，直至尾腱量夠用。

膠原蛋白的提取方法：酶法提取：酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解，水解條件溫和，反應速率快，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構，蛋白純度高，理化性質穩定，且無環境污染。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法，即利用酶液直接提取；二步法，即先用酸或者堿進行初步提取，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預處理革屑，然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產物。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白，探討了酶和酶的加入量對提取結果的影響，給出了酶對膠原提取較佳工藝配比，酶與牛腱的質量比為0.1時效果較佳，而使用無花果蛋白酶時，0.01的配比較佳。

以鼠尾膠原為支架的類似物的建立：探尋建立類似物的培養方法。方法：原代培養人皮膚成纖維細胞，制備鼠尾膠原，將鼠尾膠原溶液、濃縮培養基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細胞溶液在適當的比例下混合后形成凝膠構建類似物。結果：形成的類似物中成纖維細胞生長狀態良好，并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結論：①利用鼠尾膠原可以構建類似物，該模型是進行皮膚部位型培養和制作復合皮的關鍵與基礎；②成纖維細胞膠原凝膠復合物有著良好的生物學特性，它是研究成纖維細胞與細胞外基質之間以及細胞之間相互作用的良好模型。膠原蛋白是結締組織和內臟部位外基質的主要成分。

實驗應用：鼠尾膠原在原代培養耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果：自制的鼠尾膠原能正常地培養出大鼠耳蝸邊緣細胞，細胞角蛋白18表達陽性，免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。結論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了產率和生物相容性，降低了成本，適用于生物醫用材料。天津正規鼠尾膠原單價

鼠尾膠原醋酸溶解：將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中。溫州鼠尾膠原廠家直銷

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。溫州鼠尾膠原廠家直銷