鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,純度達到95%以上。蕪湖昆明鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:顧名思義,鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質。膠原蛋白是一種蛋白質,能幫助連接皮膚,骨頭和肌腱等身體組織。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,可用于化妝品,工業和食品生產等領域。它在實驗室中也有一定用途,因為它幾乎是純膠原蛋白。在食品加工領域,鼠尾膠原蛋白用于生產明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當作酸奶,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺和質地。它還用于生產膳食保健品,據說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進關節健康。無錫鼠尾膠原廠家批發價氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。
膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結構。此法處理快速,所得產品的分子量是連續的,適用于醫用生物材料及原料的制備,但產品得率低,設備腐蝕嚴重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。
實驗應用:鼠尾膠原在原代培養耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果:自制的鼠尾膠原能正常地培養出大鼠耳蝸邊緣細胞,細胞角蛋白18表達陽性,免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。結論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,并且制作簡便,成本低廉。使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對初步處理的鼠尾腱進行酶解。
服用膠原蛋白的注意事項:1、大分子膠原蛋白進入人體后需要降解為小分子肽、氨基酸才能被人體吸收,真正有效吸收的成分并不多。2、這些食物多半脂肪含量較高,不適合經常食用。高熱量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易產生自由基,加速老化。如果能少吃這一類食物,就等于減少了身體被自由基傷害的機會及皮膚出現黑斑、皺紋等的風險。3、孕婦是不能服用膠原蛋白產品,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,容易引起第二特征過早的發育和成熟,不利于出生后的嬰兒成長和發育。鼠尾膠原在原代培養耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。南京正規鼠尾膠原哪家便宜
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要準備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,無齒鑷1把,200ml燒杯1個,培養皿1個,帶蓋廣口瓶1個,離心管、小瓶數個,滴管若干。以上物品須經嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液。經44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,用止血鉗夾住尾巴較高,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,稱尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小時,離心。吸取其上清,分裝至小瓶,4℃保存。上述制備過程均在無菌條件下完成。蕪湖昆明鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。B.含細胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適...