外泌體的形成與鑒定：首先，細胞膜內陷形成一個杯狀結構，包括細胞表面蛋白和與細胞外環境相關的可溶性蛋白，導致早期胞內體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結構直接和已經存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內質網也能協助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內體(late-sortingendosomes，LSEs)，較終形成MVBs(也稱為多囊內小體)。MVBs是通過endosome限制膜向內凹(即質膜雙凹)形成的，這一過程導致MVBs含有多個ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白、免疫調節蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白、細胞內蛋白、RNA、DNA、氨基酸和代謝物。使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后。通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片，制成體液樣本備用。合肥正規外泌體提取試劑供應商

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物，多角度進行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察，即通常為茶托型或一側凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態、檢測速度快，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。lWesternblot分子標志物檢測：外泌體標志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；細胞質蛋白，如肌動蛋白（Actin）和鈣磷脂結合蛋白（Annexins）；使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后。南昌正規外泌體提取試劑廠家外泌體提取：差速離心。差速離心仍然是較常見的外泌體分離技術之一。

外泌體與肺病預后：在當代精細醫療的大趨勢下，外泌體的發現和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發現和早期診療提供可靠依據。根據一些病癥來源的外泌體在肺病的發生的發展和侵襲轉移過程中的作用及相關機制的研究，臨床醫療人員可以針對不同的患者制定較合適的治病方案，以達到改善肺病患者生存率，延長肺病患者生存時間的目的。但是，針對外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決，如：外泌體的純化及標記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機制及信號通路等。總而言之，外泌體的研究有著廣闊的前景，基于外泌體與肺病的研究，有望研發出能夠應用于肺病臨床診斷和治病的有效措施，造福更多的患者。

外泌體(exosomes，Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞，實現細胞之間的信息交流及物質交換，并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天然藥物載體有著獨特的優勢，表面由脂質和蛋白質組成，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運輸效率和靶向性，可以穩定存在于血液中，納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法，使得其作為藥物載體的應用受到限制。外泌體提取：在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續分布的密度階層。

研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性。與脂質體和其他合成藥物納米顆粒載體不同，外泌體含有可能增強內吞作用的跨膜和膜錨定蛋白，從而促進其內容物的遞送。CD47是外泌體蛋白質之一，是一個普遍表達的整合素相關跨膜蛋白，其部分功能可以保護細胞免受吞噬作用。CD47是信號調節蛋白α（SIRPα，也稱為CD172a）的配體，CD47-SIRPα間的結合能夠發出“不要吃我”的信號，從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進胰腺病細胞增殖，增強胞飲作用從而促進一些病癥細胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細胞有一定毒性作用，但使用外泌體能夠較小化對細胞的毒性。研究人員發現，CD47和病基因KRAS驅動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環系統的清理，并增強胰腺病細胞對外泌體的特異性。所以，外泌體的這種特性增強了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力，并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期。外泌體的提取分離：試劑盒提取。杭州正規外泌體提取試劑廠家

用于外泌體提取的體液收集注意事項：注意抗凝劑的選擇。合肥正規外泌體提取試劑供應商

外泌體的提取、分離方法：開發高效、快速、穩定，并且保持外泌體結構和生物功能完整性的方法，是目前外泌體應用于臨床的基礎和前提。從細胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多，但是外泌體的純度和產量卻和分離方法息息相關。通常分離步驟少、產率高，但是純度會受到影響。鑒于每種分離方法都有其優缺點，實驗可以根據樣本來源、下游實驗目的等，選擇合適的外泌體分離方法。2015年，國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，簡單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產量都難滿足實驗的需求。因此，推薦聯合使用各種方法，從而得到高純度和高產量的外泌體。合肥正規外泌體提取試劑供應商