原代細胞的基本結構及作用：1.細胞質（Cytoplasm）細胞膜包著的黏稠透明的物質,叫做細胞質。在細胞質中還可看到一些帶折光性的顆粒,這些顆粒多數具有一定的結構和功能，類似生物體的各種部位，因此叫做細胞器。例如,在綠色植物的葉肉細胞中，能看到許多綠色的顆粒，這就是一種細胞器，叫做葉綠體。綠色植物的光合作用就是在葉綠體中進行的。2.細胞核原代細胞質里含有一個近似球形的細胞核（nucleolus）,是由更加黏稠的物質構成的。細胞核通常位于細胞的，成熟的植物細胞的細胞核，往往被液泡推擠到細胞的邊緣。細胞核中有一種物質，易被洋紅、蘇木精、甲基綠等堿性染料染成深色，叫做染色質（chromatin）。生物體用于傳種接代的物質即遺傳物質，就在染色質上。細胞核的機能是保存遺傳物質，控制生化合成和細胞代謝，決定細胞或機體的性狀表現，把遺傳物質從細胞（或個體）一代一代傳下去。但細胞核不是孤立的起作用，而是和細胞質相互作用、相互依存而表現出細胞統一的生命過程。細胞核控制細胞質；細胞質對細胞的分化、發育和遺傳也有重要的作用會極大提高原代培養的細胞在體外存活率。長沙正規原代細胞分離試劑盒進貨價

原代細胞的獲取：1.培養時間無論是酶消化法還是組織塊法，取樣后培養時間較少需要一周以上的時間，期間可換液或者傳代。2.換液時間無論酶消化法還是組織塊法，在培養期間需要隨時關注細胞的生長狀況，需觀察其是否貼壁，是否污染，組織塊法要觀察是否有細胞遷移出來。正常情況下48~72h可換液一次。3.細胞狀態判斷正常貼壁細胞在培養幾天后，會逐漸貼滿整個瓶底或者皿底，有的呈纖維狀，有的呈多邊形。下圖均為比較健康的原代細胞圖（左：小鼠成纖維細胞；右：雞胚成纖維細胞；下：人成纖維細胞）。北京原代細胞分離試劑盒平均價格細胞培養過程中，多久更換一次培養基這取決于細胞生長的速度。

組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上，加入培養基后進行培養，原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和部位后立即進行培養。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。原代細胞在培養的過程中，也可能產生基因突變而形成無限傳代的細胞株，傳代次數越多，就越有可能變成細胞株（基因缺陷型），因此科學界也通常把靠前代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。較常用的原代細胞的培養有組織塊培養和分散細胞培養。

原代細胞培養：組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，較簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘，若懸液量大，可適當延長離心時間，但速度不能太高，延時也不能太長，以避免擠壓或機械損傷細胞，離心沉淀用無鈣、鎂PBS洗兩次，用培養基洗一次后，調整適當細胞濃度后再分瓶培養，若選用懸液中某些細胞，常采用離心后的細胞分層液，因為，經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋。

原代細胞體外培養現狀：原代細胞自然生長有兩種方式，錨定依賴或非錨定依賴，這主要取決于它們在體內的組織來源：外周血（非錨定依賴）或固體組織部位（錨定依賴）。原代細胞一旦分離后，24-48h內需要進行貼壁或起始，開始培養。廣義地說，所有的哺乳動物細胞，無論其類型或來源，都需要在與人類生理條件非常相似的條件下生長。此外，它們還需要一個pH可調節的生長環境，并且培養基中需包含細胞類型特定的營養因子、生長因子、葡萄糖和/或物品。為了確定一種特定細胞類型在低至無血清培養基中正常生長和功能所需的較低條件，相關研究工作已經揭示了生長培養基必須包含的基本成分：胰島素、轉鐵蛋白、葡萄糖和各種鹽、維生素和氨基酸1。然而，除此之外培養基也可以含有組織和細胞特異性細胞因子和增殖、生存所需的生長因子。例如，原代內皮細胞和血管平滑肌細胞都需要添加L-谷氨酰胺和成纖維細胞生長因子（FGF），但是，應該添加額外的組織特異性因子，以防止成纖維細胞的生長。應該添加額外的組織特異性因子，以防止成纖維細胞的生長。南昌正規原代細胞分離試劑盒廠家現貨

體外分裂增殖的速度較快，營養成分消耗大，換液時間隔一般較短。長沙正規原代細胞分離試劑盒進貨價

原代細胞與細胞系該如何選：原代細胞生長緩慢，一般認為，原代細胞培養的第1代和傳代到第10代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40-50代，這種傳代細胞叫做細胞株。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有變的特點，從而可能無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。長沙正規原代細胞分離試劑盒進貨價

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