拭子RNA提取試劑的選擇?操作簡便性。操作簡便性也是拭子RNA提取試劑選擇的一個重要因素。操作過于復雜,不光費時費力,還容易導致樣本間的交叉污染,也容易損失樣本。特別是用于臨床檢測或樣本量較多情況下的檢測,操作復雜如果導致交叉污染會引起誤診,還會影響出檢測報告的時間。因而,選用操作簡便、流暢的提取試劑盒非常重要。就我們曾經用過的以上三種提取試劑盒來說,Q公司的拭子RNA提取試劑盒提取過程大約25min,從樣本處理開始需要10個步驟;T公司拭子RNA提取試劑盒整個提取過程需要1個多小時,從樣本開始處理10個步驟;B公司的Biog拭子RNA提取試劑盒提取過程大約20min,從樣本開始處理7個步驟,B公司的拭子RNA提取試劑盒在操作簡便性上具有一定優(yōu)勢,更適合于較多樣本的檢測。據(jù)了解,該產品已通過藥監(jiān)局備案,也更適合臨床樣本的檢測。根據(jù)它們在不同的PH值和不同極性溶劑的溶解度不同而使得分開。上海RNA提取試劑報價
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。二、試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,提高了純度~蕪湖珠海RNA提取試劑血漿/血清RNA提取試劑盒:該試劑盒中的裂解液P1及柱結合液P2具有高效裂解及提取效果。
RNA的提取:眾所周知,Trizol是一種RNA提取試劑,內含異硫氰酸胍和酚等物質,能迅速破碎細胞和溶解細胞中的其他成分,壓制細胞釋放出核酸酶,維持細胞中RNA的穩(wěn)定性,我們可以在反應物中加入Trizol后搖勻,在加入氯仿離心,這樣的話我們的RNA就進入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,即可達到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調節(jié)反應的pH,攪拌抽提一定時間后,離心分離上清液,調節(jié)pH至等電點,經酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當稀釋,調pH7.0,這樣的話RNA就出現(xiàn)了,分別測定吸光值A260和A280并計算A260/A280,就可以測定RNA的提取率了。當然啦,我們還可以進行深入研究,如測定Nacl的濃度,PH的大小,以及抽提時間對RNA提取率的影響啦。
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒:無DNA污染,可直接反轉錄,熒光定量,不會出現(xiàn)洗脫液含絡合Mg離子成分,壓制后續(xù)PCR反應的情況。本試劑盒提取的RNA可直接用于對前期RNA提取質量非常高的后續(xù)實驗,如轉錄組RNA測序,制作基因芯片,熒光定量PCR,核酸雜交,反轉錄等所有后續(xù)實驗。一個樣十多分鐘搞定!具有多糖多酚植物RNA提取試劑盒已普及到全國各大農業(yè)大學,農科院,植物所等相關院校單位,包括中國農業(yè)大學,中國農業(yè)科學院生物技術所,作物所,蔬菜所,多糖多酚植物RNA提取試劑盒由華越洋自主研發(fā)生產,博取眾家之長,根據(jù)多年來市場反饋不斷進行技術升級和改良得來。具有操作步驟少,實驗快捷,RNA產量純度高,充分滿足后續(xù)實驗要求的需要,適用提取樣品普遍等特點。產量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,可直接用于反轉錄,實時熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實驗好的試劑盒價格比較貴,在實驗室可以根據(jù)自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用。
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同,不過除了A-U、G-C配對外,G-U也可以配對。青島正規(guī)RNA提取試劑報價
RNase主要來自樣品的細胞。上海RNA提取試劑報價
miRNA是一類內源性的約22個核苷酸的非編碼RNA分子,可參與轉錄后的基因調控。在細胞的分化和發(fā)育,細胞信號轉導和對傳染的應答等生物學過程中,miRNA發(fā)揮了重要作用。成熟的miRNA主要通過翻譯壓制來調控內源性基因的表達。miRNA的應用有miRNA模擬物和壓制劑。miRNA模擬物是化學合成的雙鏈RNA分子,通過傳染到細胞中,模擬成熟的內源性miRNA分子;miRNA壓制劑是單鏈經過修飾的RNA分子,通過傳染到細胞中,特異性的壓制miRNA的功能。miRNA模擬物和壓制劑可以用于研究單個miRNA錯誤調節(jié)所造成的生物學影響,也能用于確定某個miRNA分子的特異性靶標基因。同時有研究發(fā)現(xiàn)miR-143可調控KRAS原病基因,為病癥的醫(yī)治提供了新的靶點和醫(yī)治方法。上海RNA提取試劑報價
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...