無血清細胞凍存液的使用方法及注意事項:1.將分裝好的細胞凍存管,直接置于-80度冰箱過夜保存,次日投入液氮中保存即可備注:1、凍存過程中,第2步在冰袋附近操作時,低溫避免保護劑對細胞造成損傷。2、細胞凍存管一定要保證完全密封,否則在復蘇過程中有可能會炸(1)提前開啟水浴鍋,溫度調節到37(2)將凍存的細胞冷凍管從液氮中取出,迅速置于水浴鍋中融化,盡量1min融化,時間越短,對細胞影響越小。(3)將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養基中充分混勻,(如細胞冷凍保存液為500ul,則加入到5ml新鮮培養基中,如細胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml新鮮培養基中。)(4)混勻后立即離心,800轉,3min即可離心結束后棄上清,加入預溫的新鮮培養液。(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養箱中培養。(二氧化碳濃度根據培養基要求決定,通常為5%【注意事項】細胞系凍存密度備注正常人成纖維細胞1~310cells/ml雜交瘤細胞1~310cells/ml某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。快速凍存即不需要經過梯度降溫,直接將細胞放入-80 ℃冰箱24h。深圳無血清細胞凍存液廠家批發價
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。無錫重慶無血清細胞凍存液無血清凍存液使用方法:儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。
無血清細胞凍存液:產品優勢:1.化學成分明確,無任何外源蛋白和血清,適用于各類動物細胞株凍存。2.無需程序降溫,細胞復蘇率90%以上。3.凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱,穩定保存數年。4.即用型產品,4℃可穩定保存。細胞凍存:1.收集融合率>90%的對數期的貼壁細胞或者懸浮細胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細胞沉淀。3.加入適量細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為1x106~1x107cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細胞懸液。4.將離心管中的細胞懸液分裝與細胞凍存管中,每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細胞直接凍存于-80℃冰箱中,可穩定凍存數年。6.如若長期保存,可在次日轉移至液氮中。
細胞凍存液是如何保護細胞的:當溫度進一步下降,細胞內外都結冰,產生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度,使細胞免受溶質損傷,細胞得以在較低溫條件下保存。在復蘇時,一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內即恢復到常溫,細胞內外不會重新形成較大的冰晶,也不會暴露在高濃度的電解質溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質損傷產生,凍存的細胞經復蘇后仍保持其正常的結構和功能。存細胞時需現配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液。
無血清細胞凍存液復蘇細胞實驗步驟:1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。細胞保藏中心,用于細胞株的長期保存。南京成都無血清細胞凍存液
無血清凍存液用途:置于-20℃保存,有效期為3年。深圳無血清細胞凍存液廠家批發價
無血清快速細胞凍存液,通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存,也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色:1.高安全性,完全使用醫藥品等級原料進行生產,不含動物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產品之間有更高的產品質量一致性。2.細胞存活率高,無批次差異。3.完全凍存液配方,可直接使用,方便簡捷,可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。深圳無血清細胞凍存液廠家批發價
無血清快速細胞凍存液,通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存,也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色:高安全性,完全使用醫藥品等級原料進行生產,不含動物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產品之間有更高的產品質量一致性。細胞存活率高,無批次差異。完全凍存液配方,可直接使用,方便簡捷,可直接存放于-70℃冰箱凍存,無需經過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。反復吹吸混勻后,分裝于細胞凍存管中,每管500ul-1000ul。無錫南昌無血清細胞凍...