芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達(dá)到了數(shù)字動態(tài)范圍的實際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號偏離了線性。因此,這里使用50,000個孔展示的數(shù)字線性動態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個對數(shù)單位。前提是蛋白質(zhì)使用適當(dāng)?shù)拿笣舛冗M行標(biāo)記,這種動態(tài)范圍對于許多臨床應(yīng)用來說是足夠的 芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,微量樣本可同時測2-4個指標(biāo);!單分子技術(shù)數(shù)字ELISA檢測用時
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。
光纖束購自SchottNorthAmericaouthbri,非增強型光澤硅片購自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人,第7頁鹽酸、無水乙醇和分子生物學(xué)級別的吐溫-20均購自西格瑪-奧德里奇(圣路易斯,密蘇里州)。2.7-μm-二羧基磁珠購自瓦里安公司(加利福尼亞州萊克福斯特)。單克隆抗人TNF-α捕獲抗體、多克隆抗人TNF-α檢測試劑和重組人TNF-α均購自R&DSystems(Minneapolis,MN)。單克隆抗PSA捕獲抗體、單克隆抗PSA檢測試劑和純化的PSA購自BiosPacific(埃默里維爾,加利福尼亞州);使用標(biāo)準(zhǔn)方法將檢測試劑抗體生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基磺基琥珀酰亞胺(NHS)和SuperBlock®T-20封閉緩沖液購自ThermoScientific(Rockford,IL)。純化DNA購自綜合DNA技術(shù)公司(Coralville,IA)。 芯棄疾-勃望初芯數(shù)字ELISA使用速度抗體篩選芯片高效篩選抗體配對,5μl 樣本即可測試多種組合,縮短研發(fā)周期。
單分子陣列化技術(shù):磁珠捕獲與信號放大的**支撐,單分子陣列化技術(shù)作為數(shù)字ELISA芯片的底層架構(gòu),通過微米級捕獲結(jié)構(gòu)與二次流原理,實現(xiàn)磁珠的高密度穩(wěn)定捕獲。在芯棄疾單分子芯片中,該技術(shù)使單個芯片承載數(shù)十萬磁珠,每個磁珠作為**反應(yīng)單元,***放大熒光信號,降低背景噪聲。反應(yīng)后磁珠與量子點陣列的協(xié)同作用,進一步提升檢測靈敏度,IL-6檢測中0.2pg/ml的低濃度樣本仍能呈現(xiàn)清晰的熒光信號梯度。該技術(shù)不僅確保了單分子級別的檢測精度,更通過陣列化設(shè)計實現(xiàn)高通量并行反應(yīng),為低豐度蛋白的統(tǒng)計分析提供了充足的數(shù)據(jù)量,成為突破傳統(tǒng)ELISA檢測上限的關(guān)鍵技術(shù),支撐芯片在超敏檢測與多重分析中的優(yōu)異表現(xiàn)。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA:具有多重檢測的優(yōu)勢;
多重:單檢測孔內(nèi),可設(shè)置2-6個檢測區(qū),分別預(yù)埋不同的檢測項目或質(zhì)控抗體,單個樣本加入到單個芯片孔,可同時測試2-6個檢測項目;8孔芯片,每個孔內(nèi)有4個檢測區(qū);單次加樣本,可同時測試4個檢測項目;
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA : 多重指標(biāo)檢測;可用于同時檢測多個指標(biāo)適合以下各類項目:神經(jīng)/腦科學(xué)標(biāo)志物項目、細(xì)胞因子、心血管、腫標(biāo)標(biāo)志物、眼科、生殖、病原、微生物;每個生物/醫(yī)學(xué)實驗室都用得起的單分子免疫檢測; 自動版芯片操作簡便穩(wěn)定,2-4μl 微量樣本可測多項指標(biāo),滿足高通量檢測需求。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個酶產(chǎn)生的熒光團限制在極小范圍內(nèi),從而能夠檢測到非常低濃度的酶標(biāo)記物體積(~50fL),導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實現(xiàn)這種定位,在第二步中,將珠子加載到一個陣列為離散的微升大小的孔(圖1C)。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個孔,孔徑為μm,孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下,用橡膠密封圈密封。Rissin等人,第3頁將每個微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標(biāo)記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物(圖1D)。通過使用標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時間變化熒光圖像,可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球(“開啟”孔)和不與酶相關(guān)的微球(“關(guān)閉”孔);補充圖1顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個免疫復(fù)合物同時檢測。通過測定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對于含有珠子的孔數(shù)(圖1D)。使用SiMoA,濃度是因此,我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測單個免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。 多指標(biāo)高通量芯片替代傳統(tǒng)技術(shù),快速初篩蛋白標(biāo)記物,為疾病診斷提供多維依據(jù)。單分子技術(shù)數(shù)字ELISA檢測用時
芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,少至可以進行8孔、4孔的靈活檢測。單分子技術(shù)數(shù)字ELISA檢測用時
數(shù)字ELISA技術(shù)的未來發(fā)展與臨床轉(zhuǎn)化前景:數(shù)字ELISA單分子高敏多重生物芯片以其技術(shù)創(chuàng)新與性能優(yōu)勢,正推動免疫檢測進入“單分子時代”。未來,隨著微流控芯片與單細(xì)胞測序、質(zhì)譜技術(shù)的交叉融合,該技術(shù)有望實現(xiàn)從蛋白檢測到多組學(xué)分析的跨越;在材料層面,可降解聚合物芯片的研發(fā)將拓展其在體內(nèi)診斷的應(yīng)用場景。臨床轉(zhuǎn)化方面,其在阿爾茨海默癥超早期診斷、**標(biāo)志物高通量篩選、急診多指標(biāo)聯(lián)檢等領(lǐng)域的價值已獲驗證,隨著規(guī)模化生產(chǎn)降低成本,有望成為基層醫(yī)療標(biāo)配檢測工具。技術(shù)創(chuàng)新與臨床需求的深度耦合,預(yù)示著數(shù)字ELISA芯片將在精細(xì)醫(yī)療、公共衛(wèi)生等領(lǐng)域發(fā)揮更大作用,成為下一***物檢測技術(shù)的重要發(fā)展方向。單分子技術(shù)數(shù)字ELISA檢測用時