植物RNA提取過程：植物組織成分相對于動物組織來說復雜多樣，因此其RNA的分離和純化的難度也隨之加大，如果要完美的數(shù)據(jù)結果，那么提取純度高、完整性好的RNA就成了關鍵所在。植物RNA的提取一般會經(jīng)歷以下幾個過程：1.破碎細胞壁。2.裂解細胞膜。3.雜質去除，包括：DNA、蛋白質、多糖、多酚、次生代謝產物等。4.純化和濃縮RNA。而在RNA提取過程中，純化除雜的過程是影響RNA純度的關鍵所在。在完整的細胞內，多糖多酚類化合物，次級代謝產物，蛋白質如RNase等與核酸是分離的，一旦細胞破碎，這些物質就不可避免的會與RNA發(fā)生相互作用。RNA提取試劑注意事項：TRIReagent含有毒物質苯酚，避免接觸皮膚或吸入。徐州成都RNA提取試劑

酵母RNA的提取方法：稀堿法是屬化學破壁法，其方法是在一定堿濃度下，使構成細胞壁的蛋白質、脂肪及糖的化合物得到水解，從而破壞細胞壁，此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴格，堿的濃度不可過濃，應控制在1％，并且對提取溫度也有一定的要求，提取時間短。因為在過分劇烈的條件下，容易使核糖核酸分子內的酯鍵斷裂，使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物，是遺傳學和分子生物學的重要研究材料。由于酵母菌的細胞壁成分復雜，且較原核生物厚，難于破碎，因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細胞壁并保證RNA的完整性，是獲得高質量酵母菌總RNA的關鍵問題。總RNA的提取方法還有很多，如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等，這些方法各有優(yōu)缺點，不同的方法適用于不同類型的材料。徐州正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦拭子RNA提取試劑的選擇？洗脫液洗脫能力好，核酸的提取得率就高。

RNA提取試劑的選擇：選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時，操作方便且經(jīng)濟實用。對于動物組織、簡單的植物材料、各種微生物、培養(yǎng)細胞的totalRNA提取，Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市，進一步豐富了TakaraRNA提取的產品線。該產品采用了獨特的細胞裂解系統(tǒng)，無需苯酚氯仿抽提等步驟，簡單快捷。組織或細胞裂解后，提取操作光需20分鐘便可完成。

植物RNA提取：植物組織中，富含酚類化合物，或富含多糖，或含有某些尚無法確定的次級代謝產物，或RNase的活性較高。這些物質在細胞裂解后與RNA緊密結合形成難溶復合物或者膠狀沉淀，很難將其去除。所以我們在提取植物組織時，要選取針對植物的試劑盒，試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化、多糖化合物與核酸分離等難題。1、植物的果皮、果肉、種子、葉片等要在研缽中充分研磨，研磨過程中液氮要及時補充，避免樣品融化，研磨后的樣品應迅速加入裂解液中震蕩混勻，避免RNA降解。2、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本，則應適當減少提取用量，否則組織研磨及裂解不徹底，會使提取的RNA產量較低。3、含水分較多的植物組織例如石榴果實、西瓜果實、桃子果實等則應當適當提高樣本量（可選100~200mg）。4、植物組織，如植物葉片、根莖、堅硬的果實等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份，再繼續(xù)進行提取步驟。常規(guī)的組織勻漿機對植物組織的勻漿效果可能不佳，一般不建議使用。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。

常用總RNA提取試劑：異硫氰酸胍法和Trizol法是動物組織及動物細胞總RNA提取較常用的方法，異硫氰酸胍法操作簡單快捷，適用于樣本足夠大的常規(guī)動物組織；Trizol法裂解能力較強，尤其適合小樣本及特別難提取的組織，如兔子皮膚，動物結締組織等總RNA的提取；另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑，還可以用于植物組織、細菌、菌類等組織的提取。對于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉、油菜等還可以使用CTAB法進行總RNA的提取。提取RNA時我們經(jīng)常遇到的問題是：(1)RNA產量較低；(2)RNA有嚴重的鹽類污染；(3)RNA有嚴重的有機溶劑污染；(4)樣品降解等問題。為了使這種酶對降解的影響較小化，較好在采集時就穩(wěn)定好樣本中的 RNA。正規(guī)RNA提取試劑供應商

總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。徐州成都RNA提取試劑

RNA穩(wěn)定方法：1.在裂解緩沖液中立即溶解，使RNase失活。然后樣品可以立即處理或冷凍保存。2.浸泡在穩(wěn)定試劑中(如DNA/RNAShield)，使核酸酶失活，并在環(huán)境溫度下長時間保護核酸。這對正在實地收集樣本或處理珍貴的病人樣本(例如組織活檢、全血等)的研究人員特別有幫助。確保樣品完全溶解：在RNA提取過程中，較大限度地提高RNA產量和質量的較佳方法是保證樣品的完全裂解。然而，并不是所有的樣本都對相同的裂解方案敏感。例如，血細胞(如淋巴細胞、PBMCs等)和微生物細胞往往更難以有效地溶解。光光添加基于洗滌劑的裂解緩沖液可能并不總是足夠的。為了提高裂解效果，可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配，或者在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶K、溶菌酶等)。徐州成都RNA提取試劑