動(dòng)物細(xì)胞RNA提取：1、懸浮細(xì)胞：可直接離心后棄掉培養(yǎng)基，用無菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來，然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬不要完全棄掉液體后，往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液，這樣會使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè)，從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸，從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底，降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞：棄掉培養(yǎng)基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿，把細(xì)胞吹下來，轉(zhuǎn)移到無RNA酶的EP管中，加裂解液進(jìn)行提取。與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。無錫正規(guī)RNA提取試劑直銷價(jià)

植物RNA提取過程：植物組織成分相對于動(dòng)物組織來說復(fù)雜多樣，因此其RNA的分離和純化的難度也隨之加大，如果要完美的數(shù)據(jù)結(jié)果，那么提取純度高、完整性好的RNA就成了關(guān)鍵所在。植物RNA的提取一般會經(jīng)歷以下幾個(gè)過程：1.破碎細(xì)胞壁。2.裂解細(xì)胞膜。3.雜質(zhì)去除，包括：DNA、蛋白質(zhì)、多糖、多酚、次生代謝產(chǎn)物等。4.純化和濃縮RNA。而在RNA提取過程中，純化除雜的過程是影響RNA純度的關(guān)鍵所在。在完整的細(xì)胞內(nèi)，多糖多酚類化合物，次級代謝產(chǎn)物，蛋白質(zhì)如RNase等與核酸是分離的，一旦細(xì)胞破碎，這些物質(zhì)就不可避免的會與RNA發(fā)生相互作用。RNA提取試劑直銷廠家RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA不純，需電泳檢測。

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將50～300mg昆蟲組織放入10～15mL塑料離心管中，加入1mL溶液A，然后用勻漿器勻漿5～20秒。勻漿時(shí)會產(chǎn)生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織，硯磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片)。在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯仿，在振蕩器上振蕩30秒混勻，此時(shí)溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來。室溫12000rmp離心3～5分鐘，兩相間將有約5-10毫米厚的細(xì)胞破碎物。將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中，下層有機(jī)相和中間層含有DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，避免觸及或吸取。較好留下100μL上清液不取。加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。

酵母RNA的提取方法：稀堿法是屬化學(xué)破壁法，其方法是在一定堿濃度下，使構(gòu)成細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解，從而破壞細(xì)胞壁，此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴(yán)格，堿的濃度不可過濃，應(yīng)控制在1％，并且對提取溫度也有一定的要求，提取時(shí)間短。因?yàn)樵谶^分劇烈的條件下，容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂，使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物，是遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究材料。由于酵母菌的細(xì)胞壁成分復(fù)雜，且較原核生物厚，難于破碎，因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細(xì)胞壁并保證RNA的完整性，是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問題。總RNA的提取方法還有很多，如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等，這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，不同的方法適用于不同類型的材料。以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等，可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。

將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中，加入50～100μLRNA洗脫液，室溫放置1～2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板，內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄。昆明正規(guī)RNA提取試劑

總RNA提取試劑：提取的總RNA完整性好，無蛋白和DNA污染，可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)。無錫正規(guī)RNA提取試劑直銷價(jià)

RNA提取：預(yù)備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物，須在通風(fēng)櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上。無錫正規(guī)RNA提取試劑直銷價(jià)