經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA:這個事實可能會刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實驗支持:經(jīng)典Trizol法會選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點,源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學家,專做RNA相關(guān)的研究,包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個奇怪的“現(xiàn)象”,即貼壁細胞在消化之后,會有一些miRNA的豐度突然降低,看起來好像是被快速“降解”掉了,并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn),這個“現(xiàn)象”難以重復:如果用Trizol做實驗,就一定是陽性結(jié)果,而用試劑盒提RNA,就重復不出來。難道是號稱能提總RNA的Trizol方案出了問題?確實如此。經(jīng)進一步實驗后發(fā)現(xiàn),經(jīng)典的Trizol方案會使得低GC比的miRNA丟失。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。合肥RNA提取試劑平均價格
總RNA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護實驗,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細胞或100mg組織)。總RNA提取試劑注意事項:1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無RNA酶。操作中應小心,防止外源性RNA酶污染樣品導致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個人防護。自備新開封或?qū)iT氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。貴陽RNA提取試劑廠家當然還有其它的進口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù),已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。2、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點:操作簡單快速,處理一個樣品只需要約十分鐘。RNA純度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染。適用于各種昆蟲組織,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA。
RNA可分為:mRNA:在蛋白分子合成過程中,作為“信使”分子,將基因組DNA的遺傳信息(即堿基排列順序)傳遞至核糖體,使核糖體能夠以其堿基排列順序摻入互補配對的tRNA分子,進而合成正確的肽鏈,實現(xiàn)遺傳信息向蛋白質(zhì)分子的轉(zhuǎn)化。tRNA:把氨基酸搬運到核糖體上,tRNA能根據(jù)mRNA的遺傳密碼,依次準確地將它攜帶的氨基酸,摻入正在合成的肽鏈中,實現(xiàn)肽鏈的延伸。與正在進行翻譯的mRNA結(jié)合,而后rRNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。rRNA:一般與核糖體蛋白質(zhì)結(jié)合在一起,形成核糖體。細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:細胞質(zhì)RNA不含DNA,直接用于RT-PCR/qRT-PCR。
RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。在細胞中,RNA種類繁多。根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所。細胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,像是組成剪接體(spliceosome)的snRNA,負責rRNA成型的snoRNA,以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,可調(diào)節(jié)基因表達。RNA提取試劑:TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染。溫州正規(guī)RNA提取試劑
RNA提取試劑注意事項:硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細胞和組織中提取總RNA的試劑。合肥RNA提取試劑平均價格
rRNA是細胞內(nèi)的一種基本RNA,與r蛋白一起構(gòu)成蛋白質(zhì)合成的場所—核糖體。隨著rRNA基因序列越來越了解,其在生物研究中也的得到了更普遍的應用,主要表現(xiàn)在生物進化研究和分子流行病研究。(1)rRNA在生物進化上的研究。rRNA具有高度保守性,且普遍存在于各種生物中,rRNA提供了足夠的序列信息。現(xiàn)在還可用于在細菌分類、細菌鑒定等方面。(2)rRNA在分子流行病上的研究。目前,人們已經(jīng)把rRNA在進化上的普遍差異應用到了流行病學研究方面,通過對不同細菌進行鑒定分類,從而明確病因,追蹤傳染源,進一步控制及預防疾病。合肥RNA提取試劑平均價格
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...