當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而啟動靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而啟動細(xì)胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備，隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代，提取效率和純化效果逐漸提高。無錫外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物，多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度快，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。lWesternblot分子標(biāo)志物檢測：外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；細(xì)胞質(zhì)蛋白，如肌動蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后。無錫外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。

所有的細(xì)胞都能分泌外泌體，但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞，調(diào)控細(xì)胞生理活動。同時，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫有哪些？lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA，包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結(jié)果，涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。將人尿液來源細(xì)胞的培養(yǎng)基通過0.22微米濾膜過濾，以去除大的細(xì)胞殘片以及其它雜質(zhì)。

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個核苷酸的非編碼小RNA，能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá)，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個mRNA結(jié)合，從而阻滯整個生物通路。因此，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá)，與75例健康者相比，發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA（miR-25和miR-223）。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評估，結(jié)果顯示，12個一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá)。Cazzoli等收集了30個血漿樣本，發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA（miR-378a、-379a、-139-5p、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908。外泌體的提取方法，先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)。合肥外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨

用于外泌體提取的體液收集注意事項：抽血技巧。無錫外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

外泌體的提取、分離方法：開發(fā)高效、快速、穩(wěn)定，并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法，是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多，但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān)。通常分離步驟少、產(chǎn)率高，但是純度會受到影響。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點，實驗可以根據(jù)樣本來源、下游實驗?zāi)康牡龋x擇合適的外泌體分離方法。2015年，國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，簡單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實驗的需求。因此，推薦聯(lián)合使用各種方法，從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。無錫外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家